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背景:脑出血是一种在脑实质中发生的血管性的自发性的出血,其急性期病死率高,至今发病的机制仍不太清楚,其治疗手段也很有限。有研究表明血肿周围带的能量代谢障碍在脑出血中起着重要的作用。在生物体内,线粒体是供应能量的主要来源。在脑出血中,线粒体的功能和结构损伤与脑的能量代谢障碍直接相关。PGC-1α是核转录的共激活因子,对众多生理功能都有重要的调节作用,例如促进线粒体的生物合成,调节糖代谢等。尤其是对能量平衡,PGC-1α起到了重要的调节作用。在脑缺血中,PGC-1α参与了线粒体的生物合成和氧化应激,而线粒体的生物合成增多又促进了神经元的存活。在脑出血中其PGC-1α相关研究并不清楚。我们在本实验中将探讨PGC-1α在脑出血后的神经保护作用及其线粒体生物合成相关的保护机制。目的:探讨PGC-1α在大鼠脑出血后的保护作用和有关机制。方法:运用大鼠自体股动脉血建立大鼠脑出血动物模型。将用于实验的动物进行随机分配,分组为:假手术组(sham group)、脑出血组(ICH group)、ICH+非特异性siRNA组(ICH+nontrol siRNA group)、ICH+特异性siRNA组(ICH si RNA group)。脑出血组(ICH group)用微量注射泵在右侧基底节处定向性注射50ul大鼠自体股动脉血,处理组于ich模型前24h采用右侧侧脑室注射。讨论pgc-1α在脑出血后是否对脑有保护作用及其可能的保护机制:(1)在建立大鼠脑出血模型后1h,6h,12h,24h,48h,and72h后,各个时间段的大鼠模型断头,提取不同脑部位的组织蛋白。运用westernblot蛋白印迹法检测pgc-1α在大鼠脑出血后不同时间点的表达情况。大鼠脑出血后72h,提取大脑不同部位的脑组织蛋白。运用q-pcr和westernblot测定pgc-1α在大鼠脑组织中不同部位的表达情况。(2)对sham组、ich组、ich+nontrolsirna和ich+sirna组大鼠运用quantitativepcr及westernblot检测pgc-1αmrna和蛋白的表达,然后在不同时间点测定神经功能学的评分,在左右大脑半球测定大脑的含水量。(3)运用westernblot方法测定与线粒体生物合成相关蛋白(nrf1、tfam、sod2、ucp2)的情况。quantitativepcr法检测线粒体dna。高效液相色谱法(hplc)检测atp的浓度。透射电镜检测线粒体的形态学及数量变化。结果:(1)pgc-1α的表达在大鼠脑出血后增高,并在72h明显增高。pgc-1α的表达在大鼠脑出血同侧纹状体表达最明显。(2)同ichnontrolsirna组相比较,发现sirna明显抑制pgc-1α的mrna及蛋白质的表达。pgc-1αsirna能明显降低神经功能评分和增加出血同侧的脑含水量。(3)脑出血后,线粒体生物合成相关蛋白(nrf1、tfam、sod2、ucp2)的表达、线粒体dna的含量、线粒体的数量增高,干扰pgc-1α后,其均明显减低,并改变了线粒体结构。结论:(1)PGC-1α在大鼠脑出血后起到了一定的神经保护作用。(2)PGC-1α的神经保护作用可能通过线粒体通路来实现,而干扰PGC-1α从而影响下游线粒体信号可能会加重脑出血后的脑损伤。