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该研究根据已发表的绵羊β-防御素cDNA的基因序列(推测此段序列由前体肽和成熟肽组成)的成熟肽片段序列,设计了一对特异性引物,以克隆于T-easy-vector质粒上sBD-1cDNA全长基因为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术,对绵羊β-防御素cDNA成熟肽片段进行扩增,扩增出目的基因特异性条带,通过T4DNA连接酶将其连接于T-easy-vector上,通过电转化法将重组质粒转化到大肠杆菌受体菌DH10B中,蓝白斑筛选阳性菌落,通过菌落PCR、质粒PCR扩增及质粒酶切后琼脂糖凝胶电泳检测,证明重组质粒中含有绵羊β-防御素cDNA成熟肽片段,测序结果表明所克隆的绵羊β-防御素cDNA的成熟肽片段含有的129个碱基中,与已知的绵羊β-防御素cDNA序列相比其核苷酸有一个碱基的差异,这可能与品种差异有关,我们将重组质粒取名为T-sBD-1cDNA.研究结果表明:成功地从绵羊中分离到绵羊β-防御素cDNA成熟肽片段,该序列由129个碱基组成,编码42个氨基酸,并构建了酵母表达载体,并初步在毕赤酵母中进行了表达,这为进一步了解绵羊防御素基因的结构特性和应用开发研究奠定了一定的理论基础.