论文部分内容阅读
目的：以FH/Wjd抑郁大鼠和正常SD大鼠为研究对象,比较抑郁大鼠和正常大鼠随年龄增长的肠道微生物群落的变化,并结合血清代谢谱的变化,探讨肠道微生物与抑郁症的相互关系,为研究抑郁症患者肠道微生物菌落结构的临床试验提供基础。方法：1.强迫游泳实验(FST)和蔗糖偏好实验(SPT)验证FH/Wjd大鼠的抑郁特性。2.以454焦磷酸测序结合多变量统计学的方法检测16S rRNA基因V3区的多样性,从而研究抑郁大鼠与正常大鼠肠道菌群结构的差异,并分析抑郁大鼠肠道菌群结构随年龄增长的动态变化。3.基于气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)技术的大鼠血清的代谢组学研究方法,分析了抑郁大鼠与正常大鼠血清的代谢谱的差异,以及抑郁症模型大鼠血清的代谢谱随年龄增长的动态变化。结果：1. FH/Wjd大鼠抑郁特性验证(1)蔗糖偏好实验：SD大鼠(n=16)在6周、7周、8周龄时,蔗糖溶液饮用量占饮水总量的比例分别为86.79%±6.78%、72.11%±11.80%、77.88%±6.92%, FH/Wjd大鼠(n=16)蔗糖溶液饮用量占饮水总量的比例分别为75.24%±6.37%、65.58%±12.09%、61.59%±17.81%,FH/Wjd大鼠蔗糖偏好率在各周龄明显低于SD大鼠,p值分别为p<0.001,p=0.047,p=0.002。(2)强迫游泳实验:SD大鼠(n=16)在6周、7周、8周龄时,在水中的静止时间分别为78s±48s、60s±29s、73s±29s,FH/Wjd大鼠(n=16)在水中的静止时间分别为132s±32s、121s±59s、133s±49s,FH/Wjd大鼠在水中的静止时间显著长于SD大鼠,p值分别为p=0.001,p=0.003,p<0.001。2.肠道菌群结构分析(1) FH/Wjd抑郁大鼠的肠道菌群整体结构与SD正常大鼠具有显著的差异其中Bacteroides(拟杆菌属)、Lachnospira(毛螺菌属)、Coprococcus(粪球菌属)、Ruminococcus(瘤胃球菌属)等13个属细菌在抑郁大鼠肠道中的数量显著偏低,而Rikenella(理研菌属)、 Oscillibacter(颤杆菌克)、Anaeroplasma(厌氧原体属)等5个属细菌则显著偏高。(2)FH/Wjd抑郁大鼠细菌菌落结构随年龄增长的变化,表现为Acinetobacter(不动杆菌属)、Oscillibacter (颤杆菌克)、Bacillus(芽孢杆菌属)、Bilophila(嗜胆菌属)等8个菌属的变化。3.血清代谢谱分析(1) FH/Wjd抑郁大鼠的血清代谢谱与SD正常大鼠具有显著的差异,主要为参与氨基酸代谢、糖代谢和脂代谢等代谢途径,尤其表现在氨基酸代谢,如L-Threonine (苏氨酸)、Serine(丝氨酸)、5-Hydroxytryptamine(5-羟色胺)、Proline(脯氨酸)、beta-Alanine(丙氨酸)、 Glutamic acid(谷氨酸)、L-Asparagine(左旋天门冬氨酰)、3-Hydroxybutyric acid(3-羟基丁酸)等代谢物质。(2)抑郁模型大鼠血清代谢物随年龄变化有显著差异,主要为参与氨基酸代谢、糖代谢和脂代谢等代谢途径。在氨基酸代谢方面,瓜氨酸(Citrulline)、谷氨酰胺(L-glutamine)、尿素(Urea)、肌酸酐(Creatinine)、谷氨酸(Glutamic acid)、3-羟基丁酸(3-Hydroxybutyric acid)、苏氨酸(L-threonine)等随年龄增长而变化。结论：1.强迫游泳实验(FST)和蔗糖偏好实验(SPT)验证了FH/Wjd大鼠的抑郁特性,先天抑郁FH/Wjd大鼠可作为研究抑郁症疾病的实验模型。2. FH/Wjd抑郁大鼠的肠道菌群整体结构与SD正常大鼠具有显著的差异,以及FH/Wjd抑郁大鼠的肠道菌群结构随年龄增长也出现动态变化。3. FH/Wjd抑郁大鼠的血清代谢谱与SD正常大鼠具有显著的差异,以及FH/Wjd抑郁大鼠的血清代谢谱随年龄增长也出现动态变化,主要为参与氨基酸代谢、糖代谢和脂代谢等代谢途径,尤其表现在氨基酸代谢。