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目的:探讨Transwell体外侵袭模型适用于胆管癌侵袭性的研究的实验条件和方法。观察M受体兴奋剂及拮抗剂对胆管癌侵袭力的影响。方法:将不同浓度(0.5 1.0 1.5 2.0)*105个/ml的胆管癌细胞200μl置入Transwell小室侵袭模型,分别培养(12243648)h,观察不同浓度细胞在不同时间穿透基质凝胶多空滤膜的细胞数。选取最适浓度的胆管癌细胞与匹罗卡品共同加入Transwell的上室,调整小室内匹罗卡品浓度分别为(0 0.1 0.3 0.5)mmol/l,培养最适时间后染色计数小室膜上的细胞数。调整浓度分别为(0.01 0.01 0.050.1) mmol/l的阿托品对应匹罗卡品浓度分别为(0 0.3 0.3 0.3)mmol/l与胆管癌细胞共同加入Transwell小室培养后染色计数。结果:在第12小时穿透基质胶的细胞数目还较少,随时间延长,穿过机制凝的细胞数目增多,36小时后有逐渐饱和的趋势。同时随细胞浓度的增高,透过细胞比率也增加,但细胞大于1.0*105个/ml时瘤细胞的侵袭细胞数变化不明显。加入匹罗卡品后,穿透机制凝胶的胆管癌细胞与空白对照组比较明显增加(P<0.05),结果有统计学意义。加入匹罗卡品的高中低浓度之间的侵袭细胞数差别无统计学意义(P>0.05).只加入阿托品组侵袭的胆管癌细胞数目变化与空白对照组比较差距无统计学意义(P>0.05)。共同加入匹罗卡品及阿托品后,阿托品能抑制匹罗卡品胆管癌细胞侵袭的增强作用,差距有统计学意义(p<0.05),阿托品与匹罗卡品共同作用组的不同浓度组之间结果无统计学意义(P>0.05)。结论:36h的侵袭时间和1.0*105个/ml的细胞浓度最能体现胆管癌细胞受药物或试剂作用后的侵袭能力,而受细胞浓度和侵袭时间的影响较小。胆管癌细胞可能存在M受体,并且在胆管癌的浸润和转移中具有重要作用。