苯酚皮肤灼伤模型的建立及洗消措施选择

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目的:  研究浓度为90%的苯酚溶液引起皮肤灼伤的特点,建立苯酚Ⅱ度灼伤的大鼠模型;对比分析苯酚Ⅱ度灼伤后早期不同洗消措施的处理效果,寻找最佳洗消措施。  方法:  一、建立苯酚Ⅱ度灼伤动物模型:1、选择健康雄性SD大鼠30只,体重为280±10g,随机分5组,每组6只。脱毛后将90%苯酚溶液在各组大鼠背部正中两侧对称部位进行灼伤,时间长度为5s、1min、2min、3min、5min(每个时间长度为一组),清水冲洗15min。24h后每组随机取3只大鼠进行取材,HE染色,显微镜下观察;各组剩余大鼠继续饲养,每日观察创面变化,记录创面愈合时间。2、选取健康雄性SD大鼠20只,随机分4组,将90%苯酚溶液在实验组大鼠背部正中灼伤2min,灼伤面积为5cm×6cm(约8%TBSA),应用清水冲洗15min,随后分别于4h、6h、12h、18h取血清标本,检测各脏器损伤指标变化。二、选择最佳洗消措施:1、选择健康雄性SD大鼠24只,随机分4组,脱毛后将90%苯酚溶液在各组大鼠背部正中两侧对称部位灼伤2min,分别应用清水、75%酒精、聚乙二醇400、敌腐特灵洗消15 min(每种洗消方式为一组)。24h取材,HE染色,显微镜下观察。剩余3只大鼠继续饲养,每日观察创面变化,记录创面愈合时间。2、选取健康雄性SD大鼠40只,随机分4组,将90%苯酚溶液在各组大鼠背部正中灼伤2 min,灼伤面积为5cm×6cm(约8%TBSA),随后各组分别应用清水、聚乙二醇400(PEG400)、75%酒精、敌腐特灵洗消(擦洗1 min,清水冲洗1min,二者交替)。伤后6h取血清标本,检测各脏器损伤指标变化。  结果:  1.一般情况  苯酚接触皮肤后创面即呈苍白色,接触时间长者创面呈黄白色、稍肿胀,触之较韧,边界清楚;接触时间短者创面呈苍白色,触之柔软;苯酚灼伤后创面逐渐变为棕红色,形成痂皮;苯酚灼伤2min应用不同洗消措施处理,创面肉眼观察差异较小,呈浅红色至棕红色,边界清楚,质稍韧,无水泡形成。清水洗消创面呈棕红色,其余洗消创面呈浅红色;较大面积苯酚灼伤后SD大鼠全身反应较大,灼伤后30min可发生抽搐,先为头颈部,后扩展到四肢、躯干部,约1h左右逐渐清醒,遗棕色尿液。  2.HE染色、显微镜下观察  苯酚与皮肤接触的时间长度不同引起的灼伤深度也不同。接触时间少于1min,灼伤深度局限于真皮浅层,少部分皮脂腺受累;接触2min,皮脂腺细胞几乎全部受损;接触超过3min,损伤至真皮层深侧,绝大部分皮肤附属器受损。苯酚与皮肤接触2min,应用不同洗消措施处理,敌腐特灵洗消创面部分皮脂腺上皮未受损,洗消效果较好。除敌腐特灵组外,其余三组绝大部分皮脂腺上皮细胞变性坏死。  3.创面愈合时间  随着苯酚与皮肤的接触时间延长,创面愈合时间也相应增加。接触时间少于2min,创面多在1周内愈合。接触时间超过2min,创面愈合在1周以上;各洗消组创面愈合时间相近,约1周左右,但敌腐特灵组创面愈合时间较清水洗消组短(p<0.05)。  4.组织损伤指标变化。  (1)血清总胆红素:敌腐特灵组总胆红素水平较其余各组低,差异具有统计学意义,但其余各组间差异无统计学意义。  (2)丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST):敌腐特灵组ALT和AST水平较其余三组低,且ALT水平与清水组间差异具有统计学意义。  (3)肌酸激酶、乳酸脱氢酶:75%乙醇组与敌腐特灵组CK和LDH水平较其余两组低,同清水组差异具有统计学意义,其余各组间差异无统计学意义。  (4)肌酐:敌腐特灵组肌酐水平较其余三组低,差异具有统计学意义(p<0.05)。  结论:  浓度为90%苯酚可在短时间内导致表皮全层坏死,形成浅Ⅱ度灼伤,并且随着灼伤时间的推进,灼伤深度进一步增加。苯酚与皮肤接触2min,几乎所有皮脂腺上皮细胞受损,损伤较为典型,可作为Ⅱ度灼伤模型。敌腐特灵早期洗消创面能减轻苯酚灼伤深度及内脏损伤程度,洗消效果最好。
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