目的：　　 近年来发现,内吗啡肽(EM)是μ型阿片受体(MOR)的高选择性内源性配体,包括内吗啡肽1(EMI)和内吗啡肽2(EM2)两个亚型,通过和受体结合发挥镇痛作用。在脊髓背角和延髓背角浅层内,EM2的镇痛效应明显超过EM1。有文献报道EM2在脊髓背角对躯体信息的传递起到了调控作用,而其在内脏感觉信息传递和内脏运动中分布的报道较少。而近年的研究表明内脏的伤害性信息有可能通过伴随迷走神经的内脏感觉通路上传到孤束核(NTS),一部分初级传入纤维经臂旁核(PBN)上行至间脑等,中继后将内脏感觉冲动传至更高级的中枢,另一部分纤维终止于脑干的运动核,通过迷走一迷走反射完成各种内脏反射活动。故本实验给予大鼠胃内伤害性刺激,运用行为学检测和免疫荧光多重标记技术来证明EM2是否参与伤害性内脏信息传递,并进一步利用束路追踪结合免疫荧光组织化学的方法来寻找EM2和MOR在内脏感觉和内脏运动调控通路发挥作用的的形态学证据。　　 方法：　　 1.胃内分别给与生理盐水和稀盐酸刺激,进行内脏痛行为学检测,对刺激后2小时内每连续的15min的疼痛评分进行统计学分析。　　 2.胃内刺激2小时后,利用免疫荧光多重标记技术检测结状神经节(NG)内和脑干内FOS的表达情况及NG内的EM2和MOR的共存情况,同时观察在NG和NTS内EM2和FOS阳性神经元的关系。　　 3.将跨节示踪剂麦芽糖凝集素.辣根过氧化物酶(WGA-HRP)注射于大鼠胃壁浆膜下,标记胃-迷走神经-结状神经节-孤束核-迷走神经背核(DMV)这一内脏信息传导通路。利用免疫荧光组织化学三重标记技术,激光共聚焦显微镜下观察WGA-HRP、EM2和MOR分别在NG、NTS和DMV内的表达及共存情况。　　 4.逆行追踪剂荧光金(FG)注射于PBN,结合免疫荧光组织化学观察NTS内向臂旁核投射的神经元与EM2的关系及其FG逆标神经元与P物质受体(SPR)的共存情况。　　 6.顺行追踪剂生物素化葡聚糖胺(BDA)注射于孤束核,结合免疫荧光组织化学观察NTS向DMV投射的EM2阳性纤维或终末与MOR的关系。　　 结果：1.酸刺激组和生理盐水组对比,酸刺激组疼痛评分较高,有统计学意义,P<0.05。　　 2.酸刺激组和生理盐水组对比,2小时后NG和NTS内FOS表达明显增多,同时在NG内可见EM2/FOS双标的神经元。90％以上EM2和MOR在NG的共存在,在NTS内,EM2纤维终末与FOS/SPR双标神经元形成紧密接触,。　　 3.WGA-HRP注入胃壁后,在NG和DMV内可观察到WGA-HRP逆标的神经元,在NTS内有可见WGA-HRP标记的初级传入终末。在NG内可见WGA-HRP/EM-2/MOR三标神经元；在NTS内,WGA-HRP初级传入终末表达EM2和MOR样免疫阳性；在DMV内,WGA-HRP逆标神经元和MOR阳性胞体有双标,并且EM2终末与WGA-HRP/MOR双标神经元形成紧密接触。　　 4.FG逆行标记结果显示:在NTS内可见从NTS向PBN投射的EM2阳性神经元,并可见EM2阳性纤维围绕在逆标神经元周围；逆标的神经元与SPR有共存。　　 5.BDA顺行标记结果显示:在DMV内可见从NTS向DMV内投射的EM2阳性纤维,并且和MOR阳性神经元形成紧密接触。　　 结论：　　 1.EM2和MOR参与胃的伤害性信息的传递,将伤害性信息经由NG上传到脑干NTS内和DMV内,通过其受体MOR参与内脏信息传递。　　 2.EM2可能通过NTS向PBN投射的神经元将内脏感觉信息上传到更高级的中枢。　　 3.EM2可能通过迷走-迷走连接,将内脏感觉信息在迷走-孤束复合体进行整合后,传递到DMV,作用于MOR受体进而调控内脏运动。