液相色谱—电化学检测器测定生物样品中的痕量β2-受体激动剂

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本文利用液相色谱-库仑阵列电化学检测器(HPLC-ECD)对人血浆和尿液中的沙丁胺醇和猪肝中残留的盐酸克伦特罗两个β2-受体激动剂的检测进行了系统研究。通过对样品提取方法、流动相组成和pH、检测电势等因素的实验研究,确定了血浆及尿液中沙丁胺醇和猪肝中的盐酸克伦特罗的检测条件。首先将人血浆或尿液通过硅胶固相萃取柱,以分离富集其中的沙丁胺醇。然后用液相色谱-电化学检测器检测固相萃取柱的洗脱液。液相色谱的流动相为30mmol/L磷酸二氢钠水溶液:甲醇=90:10(其中水溶液中加入0.4% 三乙胺,并用20%磷酸调pH至6.0);四组电极的检测电势分别为300mV、400mV、550mV和650mV。在此条件下,血浆和尿样中的沙丁胺醇的回收率分别为77.32%和81.25%;检测限分别为 0.5ng/mL和2.5ng/mL。此外,又将含有盐酸克伦特罗的猪肝用匀浆机匀浆,用1mol/L盐酸溶出其中的盐酸克伦特罗,再用乙醚去除盐酸溶出液中的脂肪后,用2mol/L氢氧化钠调节溶出液pH为11.6,用乙醚萃取其中的克伦特罗。液相色谱的流动相A为50mmol/L磷酸-30mmol/L 三乙胺,并用2mol/L氢氧化钠调 pH至4.0;流动相B为甲醇:乙腈=30:45(v/v);流动相组成为A:B=80:20。四组电极的检测电势分别为450mV、600mV、650mV和680mV。在此条件下,猪肝中盐酸克伦特罗的萃取回收率为78%;检测限为1.2 ng/g。另外,本文对所建立的方法均进行了周密的验证,结果显示两个方法都准确、灵敏,适宜生物样品的检测。
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