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目的:涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)是口腔颌面部一类较凶恶的肿瘤,常好发于口腔颌面部的小涎腺。该肿瘤起病隐蔽,有沿着周围组织的神经血管呈潜行性生长的特性,通常无疼痛等自觉症状,但较早就可经血道出现转移。该肿瘤对常规的化疗、放疗治疗措施不敏感,手术切除后也容易复发,因而综合治疗效果和远期治疗效果均不理想,对人类健康构成了极大的威胁。所以深入研究SACC的生物学特性,积极寻求SACC的有效治疗方式成为了口腔颌面外科学和肿瘤学学者们孜孜以求的目标。国内外众多学者通过筛选和比较后认为:基因治疗可能是未来针对SACC最具潜力的有效根治方法。因此,深入研究SACC的生物学特性,从基因和蛋白水平,探讨SACC的发生机制,寻找与SACC的发生、发展和预后相关的生物学标记成为目前国内外研究的热点。同其他恶性肿瘤一样,SACC也存在肿瘤细胞异样增殖和细胞凋亡显著不足的生物学特性。而有关肿瘤细胞凋亡调控机制方面的研究也已日渐深入,各种各样的凋亡抑制因子不断发现。Survivin就是一种调控作用极强的凋亡抑制因子,它最早由美国耶鲁大学的Altieri在1997年首先分离成功,其主要作用有:1、抑制细胞凋亡;2、促进细胞增殖和分化;3、调控细胞周期;4、参与血管生成。目前,Survivin常常作为一种标志性的癌基因,用于多种恶性肿瘤的相关研究。但SACC中有无Survivin的合成与表达?以及Survivin在SACC的发生发展过程中的作用和意义如何?目前,国内外文献均未见报道。本研究拟用免疫组化等方法观察Survivin是否在SACC中有表达,并进一步探讨Survivin与SACC发生发展和预后的关系。方法:本实验分两部分进行。第一部分:随机抽取有随访记录的SACC石蜡标本38例,手术时间为1988-2004,手术单位为我院及重庆医科大学附属口腔医院口腔颌面外科。采用免疫组织化学(SP)法和TUNEL染色方法对SACC标本中Survivin的表达及细胞凋亡进行检测,结合临床病理特征和随访资料进行分析,研究Survivin表达的临床意义。第二部分:通过对ACC-2、ACC-M细胞株的培养,掌握ACC-2、ACC-M的形态学特征,并用免疫细胞化学(SP)法检测腺样囊性癌细胞(ACC-2)及肺转移细胞(ACC-M)中Survivin的表达,探讨Survivin在SACC细胞系中的表达强度与SACC细胞转移的关系。结果:一、SACC的Survivin表达SACC细胞的Survivin表达位于细胞浆部位,呈棕黄色颗粒状,正常的涎腺组织中未见Survivin表达。本组38例SACC标本中有26例Survivin表达阳性,阳性率为68.4%(26∕38)。二、Survivin的表达与临床病理特征的关系相关分析研究表明:SACC的survivin表达与否与患者的年龄、性别、部位、病理类型、肿瘤大小、临床分期、颈淋巴结转移无明显相关( P > 0. 05)三、Survivin表达与SACC细胞凋亡指数AI的关系SACC的Survivin表达与细胞的凋亡指数相关。survivin表达阳性组平均凋亡指数为(0.61%±0.19%),而survivin表达阴性组的平均凋亡指数为(3.24%±0.38%),其差异有显著意义(P<0.001)。四、Survivin表达与预后的关系SACC标本中survivin表达与患者预后直接相关。Survivin表达阳性患者,其术后5年存活率为38.5%(10/26),而Survivin表达阴性患者的5年存活率为83.3%(10/12),两组间有显著性差异( P < 0.05)。五、形态学观察在倒置相差显微镜下,ACC-2和ACC-M细胞均贴壁生长,为多角形上皮样细胞核大,类圆形,核仁多个清晰可见,胞浆内可看到透亮度深浅不等的颗粒,细胞分裂相多见,并有多极核分裂,排列紧密时似铺路石样,密度过高时可重叠生长,表现为接触抑制消失。HE染色光镜下可见核略偏位,胞浆外围着色较深,内有淡染区。核为浅紫色,细胞分裂相多见,可见多核巨细胞。两细胞株均表现有明显的上皮样细胞和腺样特征,符合其来源于腺上皮细胞的特点。六、细胞生长曲线ACC-2和ACC-M在接种后第二天代表细胞数量的OD值开始回升,细胞生长进入对数生长期,细胞生长曲线呈“S”型。七、ACC-2和ACC-M中Survivin的表达免疫细胞化学研究结果显示:ACC-M细胞胞浆区颗粒状棕黄色着色较ACC-2明显。其灰度值分别为168.55±10.96和126.00±13.06( P < 0. 05) , Survivin在ACC-M细胞中的表达明显强于ACC-2细胞。结论:Survivin在SACC组织中高表达,在正常涎腺组织中未见表达。Survivin在SACC中的表达,与个体的年龄、性别、部位、病理类型、肿瘤大小、临床分期、颈淋巴结转移无关,仅与肿瘤细胞的凋亡和预后有关;SACC细胞系中Survivin的表达程度与肺部转移的发生具有高度相关性。因此,对SACC组织中的Survivin进行检测,可作为SACC预后的辅助判断指标。