火龙果植株再生体系的建立

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本实验以火龙果(Hylocereusndatus)为材料,研究了火龙果的胚培养、茎段培养的影响因素。通过不同植物生长调节剂及浓度配比筛选出适宜火龙果愈伤组织诱导及不定芽再生及生根成苗的培养基,以建立稳定、快速、高效的火龙果再生体系。结果如下:1、茎段愈伤组织及其丛生芽诱导火龙果茎段表面灭菌最佳方式:75%酒精浸泡30s,再用0.1%升汞(0.1%HgCl2)低浓度溶液消毒8 min。外植体最佳接种方式为:切取2cm左右茎段纵接于培养基中。火龙果茎段诱导的最适初代培养基为:MS+6-BA 2.0 mg-L-1+NAA 0.1 mg-L-1 +IBA1.0mg·L-1火龙果茎段外植体途径诱导的“茎段2”其愈伤组织最适培养基为:MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1。愈伤组织呈黄绿色,细颗粒状,紧密,诱导率最高为89.1%。丛生芽诱导的最适培养基为:MS+2,4-D 1.0 mg·L-1+TDZ 0.4 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1,丛生芽诱导率高达94.0%,芽苗呈绿色,长势强壮。2、种子实生苗途径的愈伤组织及丛生芽诱导种子萌芽诱导最适培养基为:1/2MS培养基,种子萌发率达100%。分别以火龙果种子萌发产生的子叶、“茎段1”、胚轴为外植体,进行愈伤组织和丛生芽的诱导试验。“茎段1”的愈伤组织诱导率可达到93%,愈伤组织呈黄绿色带白色疏松状,容易褐化死亡;子叶愈伤组织诱导率最低为25.3%;胚轴愈伤组织诱导率最高为93.3%,愈伤组织呈黄绿色致密颗粒状。将胚轴接种于MS+6-BA 2.0 mg·L-1+2,4-D 0.5 mg·L-1的愈伤组织诱导率最高。但是胚轴产生的愈伤组织块在添加TDZ 0.4 mg·L-1、2,4-D 0.5 mg·L-1、NAA 0.5 mg·L-1时进行分化培养后不定芽分化率较高为81%,但是诱导的丛生芽普遍呈现生长势偏弱的现象,培养出的不定芽不利于生根培养。3、组培苗生根及移栽生根诱导最适培养基为:MS+CCC 0.5 mg·L-1+6-BA 3.0 mg·L-1+AC 200 mg·L-1,活性炭(AC)有效抑制基部褐化,促进根生成。生根率达到94.7%,平均根数6.7条/株,平均根长达10.1 cm。火龙果的组培苗移栽到珍珠岩:蛭石:腐叶土=(1:1:2)的基质,成活率达到97%,适当施肥管理,其茎段粗壮,生长势强。
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