藏药三果汤散的化学成分分析及代谢组学初步研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 14次 | 上传用户:wangxiangbin
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藏药三果汤散由诃子Terminalia chebula Retz.毛诃子T.billerica (Gaertn.)Roxb、以及余甘子Phyllanthus emblica L组成,具有清除血热、化解坏血的功效。三果汤散作为众多藏药方剂的基础方,在藏医临床上可用于高原疾病的治疗。现代研究表明高原疾病的产生是由于高原缺氧后导致自由基失衡,氧化应激致使细胞凋亡所出现的一系列病理变化。因此,本研究以空白大鼠为研究对象,采用代谢组学的研究方法,分别以GC-MS, HPLC为分析手段,分析藏药三果汤散干预前后血液中代谢物的变化情况。目的:1、对毛诃子乙酸乙酯部位进行化学成分研究。2、对藏药三果汤散中没食子酸和鞣花酸进行定量分析。3、对藏药三果汤散干预正常大鼠前后血浆中代谢物全谱的动态变化情况进行初步研究。方法:1、采用硅胶柱层析、聚酰胺柱层析、制备薄层等植物化学分离方法,对抗氧化活性较强的毛诃子乙酸乙酯部位的化学成分进行研究,结合1H-NMR.13C-NMR现代波谱技术确定化合物的结构,制得对照品为后续定量工作提供基础。2、采用高效液相色谱法,测定三果汤散中具有较强抗氧化作用的没食子酸和鞣花酸的含量。3、以HPLC作为分析手段,研究藏药三果汤散干预空白大鼠血浆中游离氨基酸的代谢谱图,并采用PCA、PLS-DA统计学方法对血浆中氨基酸代谢图谱进行分析识别。4、采用硅烷化血浆衍生方法,结合GC-MS色谱联用技术,对空白大鼠和高、中、低剂量三果汤散干预的大鼠血浆进行提取和分析;并采用PCA、PLS-DA统计学方法对血浆代谢图谱进行分析识别。结果:1、从藏药毛诃子乙酸乙酯部位共分离八个化合物,分别为:没食子酸、鞣花酸、3-3’-二甲氧基鞣花酸,2,2,-二甲氧基-3,3’-二羟基-5,5,-氧-6,6’-联二苯甲酸酐、粘酸-二甲酯-2-O-没食子酸酯、柯里拉京、β-谷甾醇、鞣酸-3,3’-二甲醚-4-O-β-D-木糖苷。2、建立了HPLC法测定藏药三果汤散中没食子酸和鞣花酸含量的方法,在没食子酸和鞣花酸分别在0.0500-0.7000mg,0.0502-0.7140mg范围内呈良好线性。3、结合化学计量学模式识别的方法,能够很好的将三果汤给药组和空白组大鼠区分。采用分类特征变量找到了6种潜在生物标记物。
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