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膀胱肿瘤是临床上最常见的一种泌尿系统肿瘤，而且也是一种威胁患者生命的疾病。膀胱癌的生物学行为特别复杂，主要变现为：复发、多发、浸润和转移等。90%的膀胱癌是尿路上皮癌，且具有高复发性率。膀胱癌的发生、发展及复发机制目前尚不明了，近年来随着相关研究的深入，发现转化生长因子β1（Transforming growth factors β1，TGF-β1）能促进肿瘤血管的生成从而导致癌细胞的扩散转移。目的：探讨通过选择人工设计合成抑制作用最佳的TGF-β1siRNA转染入人膀胱癌细胞株进行培养，来明确TGF-β1siRNA对膀胱肿瘤血管生成的影响。方法：将膀胱癌细胞株进行培养，取对数生长期的膀胱癌细胞分为常规细胞组、脂质体组（阴性对照组）和3组（A组、B组和C组）含不同TGF-β1siRNA表达载体组。选择人工设计合成好的三种TGF-β1siRNA，通过质粒分别转染入A组、B组和C组后，转染细胞培养24小时后使用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)与双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（Elisa）共同检测转染TGF-β1siRNA的人膀胱癌细胞株TGF-β1的表达，选出最佳抑制组。取对数生长期的膀胱癌细胞进行转染，将膀胱癌细胞分为EJ肿瘤细胞组、对照组（TGF-β1组）、重组质粒组（TGF-β1siRNA表达载体组）。对照组采用10ng/ml TGF-β1刺激，转染细胞培养24小时后应用蛋白印迹法（Western Blot）检测该组与正常EJ细胞组、TGF-β1组、重组质粒组中血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平。结果：人膀胱癌细胞株培养良好，TGF-β1siRNA转染成功。RT-PCR检测发现：与常规培养的EJ细胞组比较，TGF-β1mRNA在转染空白质粒的EJ细胞组内的表达无统计学意义(P>0.05)，表明转染的空白质粒对TGF-β1mRNA的表达无明显干扰；与常规细胞组和空白质粒组比较，TGF-β1mRNA在三个不同TGF-β1SiRNA组EJ细胞内的表达均有显著下降(P<0.05)，其中C组最显著(P<0.01)，表明所设计的三种TGF-β1SiRNA对TGF-β1mRNA的表达均具有抑制作用，其中C组TGF-β1SiRNA序列与其他序列比较具有最佳抑制效果。Elisa检测发现：与常规培养的EJ细胞组比较，TGF-β1蛋白在转染空白质粒的EJ细胞内的表达无统计学意义(P>0.05)，表明转染的空白质粒对TGF-β1蛋白的表达无明显干扰，与RT-PCR检测的结果一致；与常规细胞组和空白质粒组比较，TGF-β1蛋白在三个不同TGF-β1SiRNA组EJ细胞内表达均有显著下降(P<0.05)，与RT-PCR检测结果一致，TGF-β1蛋白的Elisa检测也印证了所设计的三种TGF-β1SiRNA对TGF-β1的表达均具有抑制作用。使用Western Blot检测各组VEGF蛋白的表达：与正常EJ细胞组比较，VEGF蛋白在转染TGF-β1质粒的EJ细胞中的表达量显著增大(P<0.05)，表明VEGF蛋白的表达与TGF-β1呈正相关；与正常EJ细胞组和TGF-β1组比较，VEGF蛋白在转染TGF-β1siRNA质粒的EJ细胞中的表达量显著减少(P<0.05)，表明膀胱癌EJ细胞VEGF蛋白的表达随着TGF-β1基因沉默而减少。结论：转染TGF-β1siRNA质粒的EJ细胞VEGF蛋白的表达显著减少，从而肯定了TGF-β1siRNA对膀胱肿瘤血管内皮生长因子的合成有明显的抑制作用。