论文部分内容阅读
目的:通过观察针刺结合运动训练对神经运动功能、学习记忆能力、微管相关蛋白(MAP-2)、突触素(P38)表达变化的影响,探讨针刺结合运动训练对脑梗死大鼠学习记忆能力、中枢神经系统树突和突触的可塑性影响及其可能机制。
方法:(1)参照小泉线栓法建立Wistar大鼠右侧大脑中动脉脑梗死(MCAO)模型。 (2)将80只WistarMCAO大鼠随机分成4组:假手术组8例,模型组24例,运动训练组24例,针刺运动训练组24例。模型组、运动训练组和针刺运动训练组每组各分三个时段进行观察,分别为手术后1周、3周、5周,每时段各为8只。(3)动物清醒后进行模型成功评价。均单独小鼠笼饲养,运动训练组大鼠于手术后第五天开始每天进行滚筒式网状训练、转棒训练、平衡棒训练及网屏训练。针刺运动训练组大鼠除运动训练外(同运动训练组)于模型成功评价后进行头穴针刺治疗。(4)假手术组于手术前后分别进行1次神经功能和运动能力测评,模型组、运动训练组和针刺运动训练组在术后各时段进行神经功能及运动功能评分,在术后5周进行学习记忆能力测评。观察针刺与运动训练对MCAO大鼠行为学和学习记忆功能恢复的影响。 (5)用MAP-2免疫组织化学实验试剂盒,SABC法色各组脑梗死患侧海马CA3区的MAP-2表达变化特点,探讨针刺与运动训练对树突可塑性的影响。 (6)用P38免疫组织化学实验试剂盒,SABC法显色各组脑梗死患侧海马CA3区的P38表达变化特点,探讨针刺与运动训练对突触可塑性的影响。(7)用图像分析技术对各组免疫组化实验结果进行定位、定性、定量统计。(8)用SPSS11.5 for windows对统计结果进行统计学分析。
结果:(1)假手术组术后的神经功能和运动能力评分与手术前无差异。模型组、运动训练组和针刺运动训练组术后神经功能和运动功能较手术前和假手术组均出现明显变化。针刺运动训练组神经功能评分优于模型组和运动训练组,与模型组比较在术后1周时差异有极显著性(P<0.01),术后3周、5周时差异有显著性(P<0.05);与运动训练组比较术后1周、3周比较差异有显著性(P<0.05),术后5周时比较无显著性差异。针刺运动训练组运动能力评分优于模型组和运动训练组,与模型组比较在术后1周、3周时差异有极显著性(P<0.01),术后5周时平衡木步行和网屏实验比较差异有显著性(P<0.05),而转棒步行训练差异仍有极显著性(P<0.01);与运动训练组比较在术后1周、差异有显著性(P<0.05),术后3周时转棒步行训练差异有显著性(P<0.05),其余比较无显著性差异。(2)相应认知功能检测针刺运动训练组Y-型迷宫分辨学习能力优于运动训练组,差异有显著性(P<0.05);和模型组比较,差异有极显著性(P<0.01)。(3)假手术组MAP-2阳性纤维排列整齐,分布密集。梗死后梗死灶中心区无MAP-2阳性染色,边缘区仅见少量阳性短树突纤维。患侧海马CA3区阳性神经元及树突纤维减少,光密度值于术后l周最低,后逐渐增高,至术后5周时仍低于正常对照组。术后1周模型组、运动训练组MAP-2阳性纤维明显减少,针刺运动训练组MAP-2阳性纤维稍有增多,和模型组、运动训练组比较差异均有极显著性(P<0.01):在术后3周、5周时MAP-2阳性表达较模型组明显增多,与运动训练组比较差异有显著性(P<0.05),和模型组比较差异有极显著性(P<0.01)。(4)假手术对照组海马CA3区可见突触素免疫阳性产物呈点状、小团块状弥漫分布,突触素阳性物在神经细胞表面排列成环状或半弧形,胞浆中仅有较弱的反应,在神经纤维间排列呈大小不一、不规则团块状,少数沿神经纤维两侧排列呈线状。梗死后梗死灶中心区无明显阳性染色,患侧海马CA3区突触素染色阳性纤维从缺血第7天开始逐渐增多。针刺运动训练组在术后1周P38光密度稍有增强,和模型组、运动训练组比较差异均有显著性(P<0.01);在术后3周P38光密度明显增强,与运动训练组比较差异有显著性(P<0.05),和模型组比较差异有极显著性(P<0.01)。在术后5周在术后与运动训练组比较差异无显著性,和模型组比较差异有显著性(P<0.05)。
结论:(1)脑缺血损伤后患侧海马CA3区存在明显的树突结构可塑性变化,且针刺配合运动训练可明显促进这种可塑性改变,且MAP-2表达增加与学习记忆功能恢复成正相关。 (2)在脑缺血损伤后恢复过程中,伴有患侧海马CA3区的突触可塑性变化,针刺配合运动训练可增强这种变化,且突触素表达增加与学习记忆功能恢复成正相关。(3)针刺配合运动训练能明显改善脑缺血大鼠的神经功能、运动能力和学习记忆能力。