基于量子点和MoS2的光化学传感器对肝癌标志物microRNAs的检测

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癌症是严重威胁人类健康的常见病和多发病,而肝癌是世界上第三大最常见的和肿瘤死亡有关的疾病。肿瘤标志物的发现为癌症的诊断和治疗带来了巨大的变化,肿瘤标志物中的很大一部分属于microRNA(miRNA)。因此,对miRNA的检测是一个很重要的内容。本文利用了量子点(QDs)的共振光散射信号和荧光性质从共振光散射光谱(RLS)和荧光光谱两个方面对肝癌的肿瘤标志物进行了检测。此外,利用MoS2作为荧光猝灭剂对于肝癌标志物的检测也取得较好的结果。其主要内容如下:1、通过设计CdTe QDs-P探针,开发了一种简单的RLS生物传感器对miRNA-122的灵敏性和选择性的检测。考察了QDs上面DNA的覆盖率对RLS体系的影响;此外,还考察了杂交反应的时间、温度以及粒子的浓度对体系RLS强度的影响。在最优的实验条件下,共振光强度的变化值(ΔIRLS)与目标物miRNA-122的浓度在0.10 nM到4.80 nM的范围之内有较好的线性关系,在没有循环放大的情况下,对miRNA-122的检出限达到9.4 pM,并成功应用于血清样品的加标回收实验。2、利用QDs的光稳定性和较大的斯托克斯红移的性质,合成了两种不同发射波长的核壳型CdTe@CdS QDs,实现对两种肝癌肿瘤标志物miRNAs的高灵敏性和高选择性的同时检测。在最优的实验条件下,荧光强度的变化值(ΔF)与目标物miRNA-122的浓度在5 nM到270 nM的范围之内有较好的线性关系;ΔF与目标物miRNA-99a/b-3p的浓度在10 nM到350 nM的范围之内有较好的线性关系。此方法最终成功应用于血清样品的加标回收实验和细胞裂解液中对miRNA的检测实验。3、利用MoS2能吸附单链DNA和荧光猝灭的性质,通过HCR技术与G-四联体结构的结合,实现了对肝癌肿瘤标物mi RNA-199a/b-3p的高灵敏性和高选择性的检测。考察了反应体系中各种条件对荧光信号的影响;此外,单层MoS2纳米片的引入大大地降低了体系的背景信号,使荧光信号进一步放大。ΔF与目标物miRNA-99a/b-3p的浓度在0.1 nM到100 nM的范围之内有较好的线性关系,对miRNA-199a/b-3p的检测达到5.9 pM。该方法最终成功的应用于细胞裂解液中对miRNA的检测实验。
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