中华蚊母愈伤组织的诱导和显微观察

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中华蚊母属于国家二级濒危珍稀植物,常绿灌木,是一种具有很高观赏价值的盆景,主要分布在长江流域。由于近些年对中华蚊母毫无节制的滥采滥挖,还有三峡工程大江截流,使之数量大量减少。目前并没有人对中华蚊母进行愈伤诱导,本文主要采用叶片进行愈伤组织的诱导。愈伤组织生长的最适温度是20-24℃。一般在接种9天后,就会有愈伤组织的出现。在不添加任何激素的MS培养基上没有诱导出愈伤组织。发现单一激素诱导效果比较好的是1/2MS+6-BA0.5mg/l,1/2MS+2,4-D0.01。组合激素的诱导效果大部分都好于单一激素的作用,尤其以1/2MS+6-BA0.5+NAA0.5,1/2MS+6-BA0.5+2,4-D0.4,1/2MS+NAA0.1+TDZ0.2,1/2MS+2,4-D0.25+KT0.05效果比较好,诱导率也很高,大多数可以达到100%。愈伤组织生长状况良好,大部分为绿色,紧凑,旺盛,但是一般在生长三天后会分泌次生代谢物,所以在接种的时候,预先用PVP进行处理。生长三周后愈伤组织会褐化,愈伤组织的寿命都不是很长,很容易死亡。这些应该是影响中华蚊母愈伤组织不能分化的一些原因。取中华蚊母的叶片,9天,11天,16天,17天,18天,20天,24天,26天,28天,30天生长的愈伤组织和完全愈伤组织,用FAA固定。采用石蜡切片法,在显微照相机下拍照,通过比较,发现是叶片中的栅栏组织和海绵组织诱导出愈伤组织,大部分是海绵组织。但是并没有发现维管束参与愈伤组织的形成。
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