目的:采用HE,甲苯胺蓝,免疫组化,电镜等方法,观察发育期大鼠间歇性低氧及急性低氧后大脑皮质C-FOS、BAX的表达,旨在探讨间歇性低氧对脑缺氧损伤时C-FOS、BAX表达的影响,为间歇性低氧对发育期大鼠脑保护作用的机制提供形态学依据。材料与方法;将新生雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为28天、42天、56天三组,每组又分为对照组、急性低氧组、间歇性低氧组、间歇性低氧+急性低氧组四个小组,共12组。对照组动物不接受任何处理,急性低氧动物取标本前给予混合气体(10%氧气+90%氮气)10分钟,间歇性低氧动物(连同母鼠)置于低压氧舱,分别接受28、42、56天的相当于3000米海拔的减压低氧处理,每天5小时。分别于第29、43、57天取材。戊巴比妥那麻醉后快速断头,开颅取大脑顶叶皮质,4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,切片,用于光镜及免疫组化研究。电镜标本用2.5%戊二醛固定,饿酸后固定,树脂包埋,超薄切片,电镜观察。结果:1 HE及甲苯胺蓝染色:对照组与间歇性低氧组之间无明显差异。给予急性低氧后可见神经元呈现不同程度的损伤变性的改变,表现为大脑皮质正常结构遭到破坏,胞质透亮,尼氏体溶解消失,核偏位。同时还可看到神经元胞体缩小,胞核固缩深染,细胞呈三角形。细胞周围间隙明显增宽,损害严重的细胞呈空泡状。给予间歇性低氧加急性低氧后:大脑顶叶皮质神经元可见一定程度病理损伤,表现为胞体肿胀,尼氏体边聚,缺氧损伤明显减轻。这一结果显示间歇性低氧在脑缺氧损伤中提供神经保护作用。2免疫组化结果2.1 BAX:BAX蛋白免疫阳性细胞呈黄色,主要位于细胞浆内,胞核也可看到,染色呈颗粒状或条索状。56天对照组:胞浆内颗粒状免疫反应产物较少见,其OD值为0.1239±0.0054。56天间歇性低氧组:变化不明显,其OD值为0.1229±0.0046(与对照组相比P>0.05)。56天间歇性低氧加急性低氧组:BAX表达逐渐增多,其OD值为0.2629±0.0029。(与对照组相比P<0.01)56天急性低氧组:BAX表达明显增多,阳性细胞布视野,其OD值为0.3449±0.0047。(与对照组相比P<0.01)。42天、28天变化趋势与56天相同。BAX蛋白免疫阳性表达在对照组、间歇性低氧组和急性低氧组中三个时间段之间无差异性(P>0.05)。在间歇性低氧加急性低氧组中,28天组:阳性表达较明显,其OD值为0.2020±0.0017;42天组:免疫反应产物增多,其OD值为0.2617±0.0058(与对照组相比P<0.01);56天组:OD值为0.2629±0.0029(与对照组相比P<0.01)。其中,42天组与56天组之间变化不明显(P>0.05)。2.2 C-FOS:免疫反应阳性产物呈棕黄色,位于细胞核内,胞浆空白。28天对照组:其大脑顶叶皮质中阳性细胞较少见,其阳性细胞率为38.34±0.20。28天间歇性低氧组:变化不明显,其阳性细胞率为38.32±0.23(与对照组相比P>0.05)。28天间歇性低氧加急性低氧组:免疫阳性细胞数逐渐增多,其阳性细胞率为47.43±0.30(与对照组相比P<0.01)28天急性低氧组:免疫阳性细胞数明显增多,呈强阳性表达。与对照组阳性细胞数相比有显著差异,其阳性细胞率为80.27±0.28(与对照组相比P<0.01)。42天、56天变化趋势与28天相同。C-FOS蛋白免疫阳性表达在对照组、间歇性低氧组和急性低氧组中三个时间段之间无差异性(P>0.05)。在间歇性低氧加急性低氧组中,28天组:胞核内颗粒状免疫反应产物表达较明显,其阳性细胞率为47.43±0.30。42天组:免疫阳性细胞数增多,阳性强度增强,其阳性细胞率为54.39±0.28(与28天组相比P<0.01)。56天组:阳性细胞率为54.45±0.30(与28天组相比P<0.01);但与42天组相比,差异不明显(与42天组相比P>0.05)。3超微结构的变化对照组与间歇性低氧组之间无明显差异性。给予急性低氧后,神经元变性明显,核固缩,核膜皱折,常染色质减少,出现核膜下边集现象;粗面内质网明显扩张、水肿、脱颗粒;线粒体肿胀,嵴断裂、溶解、消失。突触结构遭到破坏,突触小泡较少、破裂甚至融合,嵴减少消失呈空泡状,突触间隙模糊,前后膜不明显。给予间歇性低氧加急性低氧后,神经细胞粗面内质网、高尔基复合体轻度扩张;线粒体肿胀,嵴模糊紊乱。突触前成分内的突触小泡积聚,且大多位于周边。突触前后膜变薄,突触间隙变窄,线粒体膨胀。与急性低氧组相比,给予间歇性低氧后,明显减轻了缺氧损伤。结论:脑急性缺氧刺激后,神经元表现出不同程度的损伤,可以诱发C-FOS,BAX蛋白的广泛表达。同时给予间歇性低氧后,可以有效减少C-FOS,BAX蛋白的表达,说明间歇性低氧在脑缺氧损伤中提供神经保护作用。此外,年纪较轻的动物,对脑缺氧损伤具有更强的耐受性。