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先天性甲状腺功能减低症（Congenital hypothyroidism, CH）是一种最常见的先天性内分泌疾病，目前报道的发病率为1:1400-1:2800。CH是由于甲状腺的分化、迁移或发育过程异常，或者是由于参与甲状腺激素合成和分泌过程中的基因突变，造成甲状腺激素不足所致的。目前已发现有5个基因的遗传变异与甲状腺发育异常有关，包括TSHR、PAX8、TIF1、TIF2与NKX2-5基因，7个基因的遗传变异可导致甲状腺激素合成障碍，包括NIS/SLC5A5、PDS/SLC26A4、TPO、DUOX2、DUOXA2、TG与IYD/DEHAL1基因。过氧化氢（H2O2）的产生是甲状腺激素合成过程中的一个关键的步骤，而双氧化酶2（DUOX2）是产生H2O2的关键酶。近年来，国外越来越多的文献报道伴甲状腺位置正常、大小正常或肿大的CH与DUOX2基因突变有关，但目前国内关于DUOX2基因突变与CH的关系、发病率、临床表型与分子突变特征的研究文献很少，在广州地区还是一片空白。开展本地区CH患儿DUOX2突变研究，对预测疾病的转归、遗传咨询、探索新的治疗方法提供重要理论依据；对提高CH的病因诊断水平、规范CH病因诊断流程、提高出生人口素质均有重要的意义。 目的: 探讨广州地区新生儿筛查、确诊的疑似甲状腺激素合成障碍性CH患儿DUOX2基因突变的检出率、基因突变特点、临床表型，并探索基因型与表型的关系。 对象与方法: 回顾分析2011.1.1-2012.12.31期间广州市新生儿筛查中心对433578名新生儿进行CH筛查的资料，共确诊CH患儿156例。除2例甲状腺超声结果不详外，根据初次诊断时的甲状腺超声检查结果，分为2组：1）甲状腺发育异常组：36例，包括甲状腺异位、甲状腺缺如、甲状腺发育不良等；2）疑似甲状腺激素合成障碍组：118例，甲状腺位置正常，大小正常或肿大。对疑似甲状腺激素合成障碍组中的96例患儿进行DUOX2基因突变分析，包括男性56例，女性40例。CH的新生儿筛查、诊断和治疗按照2010年中华人民共和国卫生部颁布的《新生儿疾病筛查技术规范》及2011年《先天性甲状腺功能减低症诊疗共识》的标准进行。生后2-3岁停用左旋甲状腺素钠（L-T4），4周后再评估甲状腺功能及甲状腺超声，判断CH的临床转归：暂时性CH或永久性CH。 DUOX2基因突变分析：提取外周血或干血滤纸片基因组DNA，采用PCR及直接测序法对DUOX2基因的33个编码外显子及两侧侧翼序列进行突变分析。参照人类基因突变数据库（HGMD）、千人基因组数据库、dbSNP数据库以及近期文献，判断检出的突变是否为已报道致病突变或单核苷酸多态性（SNP）。如检出复合杂合突变或新突变，对先证者父母的DNA进行相关位点检测，分析突变来源。对新突变，以50例无血缘关系、CH筛查阴性的新生儿DNA作对照，进行相应位点对比分析；并对新突变进行10个不同物种突变位点的氨基酸保守性分析；采用SIFT与PolyPhen-2软件对新错义突变进行蛋白质功能预测。结合临床资料，探讨DUOX2基因型和表型的关系。 结果: 1.根据甲状腺超声检查结果对CH进行初步分类，除了2例因缺乏超声检查结果而不能分类外，在确诊的156例CH患儿中，其中118例（76.6％）为疑似甲状腺激素合成障碍，36例（23.4%）为甲状腺发育异常。广州地区CH的发病率为1:2779。134例患儿进行甲状腺功能再评估显示，暂时性CH与永久性CH分别占65.7%与34.3%。 2.96例疑似甲状腺激素合成障碍组的患儿进行了DUOX2基因突变分析，其中60例（60/96，64.6%）患儿共检出了81个等位基因突变，共发现了23种不同的突变，包括13种新突变（p.R82C、p.W178C、p.L768P、p.F1218L、p.F1392L、IVS5-2A>G、IVS26-1G>A、 IVS28+1G>T、 c.377-379delCCG、 c.477delC、 c.605-621del17、c.3516-3531del16和c.647-656del10ins15）。21例患儿携带双等位基因突变，39例携带单等位基因突变。p.K530X突变最常见，占所有检出突变等位基因的39.5%（32/81），占DUOX2基因突变检出人数的45.0%（27/60）。92.6%的突变位点发生在外显子5、6、9、14、17、20、25、27与28中。 3.13种新突变在HGMD、千人基因组数据库、dbSNP数据库、新近文献及50例正常对照中均未检出；5种新错义突变氨基酸在多物种间高度保守，SIFT、PolyPhen-2软件预测均提示突变氨基酸影响蛋白结构及功能，考虑为致病性突变可能性大。 4.60例DUOX2基因突变患儿中，初筛时的bsTSH<45 mIU/L占67.8%；确诊时的sTSH>45.00 mIU/L占70.0%，fT4<12 pmol/L占86.7%，甲状腺肿大占88.3%，即确诊时呈典型CH生化及影像学特点。L-T4的维持剂量为1.8（0.9-3.6μg/kg/d），TG水平正常或增高（中位值为57.21，范围为9.40-486.30 ng/ml）。对55例突变患儿随访再评估结果显示，暂时性CH与永久性CH分别占78.2%与21.8%。 5.有DUOX2基因突变组与无DUOX2基因突变组、DUOX2双等位基因突变组与单等位基因突变组比较，初筛时的bsTSH、确诊时的sTSH、fT4、再评估时的TG水平以及L-T4的维持剂量均无统计学意义（P值均>0.05）。 结论: 1.广州地区CH的发病率为1:2779，其中疑似甲状腺激素合成障碍者占76.6%。暂时性CH与永久性CH分别占65.7%与34.3%。 2.DUOX2基因突变在疑似甲状腺激素合成障碍性CH患者中的检出率为62.5%（60/96），其中78.2%为暂时性CH。DUOX2基因突变是广州地区疑似甲状腺激素合成障碍性CH的主要分子遗传学发病基础，与暂时性CH有关。 3. p.K530X为最常见突变，高突变率外显子5、6、9、14、17、20、25、27与28可用于DUOX2基因的突变筛查。本研究发现了13个DUOX2基因新突变，丰富了DUOX2基因的突变谱。 4. DUOX2基因双等位基因突变或单等位基因突变均可导致CH，未发现DUOX2基因型与表型的关系。