绿脓杆菌烧伤创面脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的研究

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目的观察绿脓杆菌所导致的烧伤创面脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织的细胞凋亡及肺损伤情况。方法以SPF级SD大鼠为试验动物,完全随机地分为两组,试验组采用烫伤后痂下注射绿脓杆菌复制创面脓毒症模型,对照组烫伤后痂下注射生理盐水作为对照。分别于烫伤后创面痂下注射细菌或生理盐水0h、2h、12h、24h和48h以1%的戊巴比妥钠25mg/kg腹腔注射麻醉后处死大鼠。切取痂组织,进行组织细菌定量检测。取出肺组织,行肺组织HE染色,观察病理变化,肺组织损伤评分。TUNEL法检测细胞凋亡,计量凋亡指数(AI),分析细菌含量与凋亡指数之间的关系。结果试验组创面组织细菌定量明显超过同时间对照组细菌含量,随时间变化逐渐增多,且于2h即达到10~5CFU/g。肺组织病理检查显示肺组织HE染色可见肺泡间隔增宽,间质充血水肿,肺泡腔变窄,炎症细胞渗出,小气道损伤等病理改变,试验组损伤改变明显重于同时间对照组,且随时间变化,损伤逐渐加重。肺组织损伤评分以量化的形式反映肺组织损伤变化,通过肺损伤评分反映试验组损伤改变明显重于同时间对照组,且证实两组之间的改变存在统计学差异。TUNEL法检测发现肺组织内细胞发生凋亡,细胞包括支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、血管内皮细胞以及炎症细胞。试验组AI明显高于同时间对照组AI,且在24hAI最高,随着时间延长AI呈现先增长后下降趋势。组织细菌量与AI相关性分析显示,组织细菌量在0h-24h与AI呈正线性相关。结论绿脓杆菌导致脓毒症时肺组织内大量细胞发生凋亡,在急性肺损伤早期,随着创面组织细菌量增加,脓毒症的加重,肺组织的凋亡亦增加。随着脓毒症的逐渐加重,肺损伤也逐渐加重。
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