M蛋白是新城疫病毒的主要结构蛋白之一。它位于病毒囊膜的内表面，具有高度保守的抗原表位。本研究的目的是克隆并表达M基因，为建立ELISA方法奠定基础。本研究将收获接毒鸡胚的尿囊液，超速离心沉淀病毒，采用TRIzol法提取病毒RNA，利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出新城疫病毒M的cDNA。采用玻璃奶法回收纯化目的片段，PCR产物通过T-A连接到线性克隆载体pMD18-TSimplevector。转化DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆，提取质粒，进行酶切鉴定、PCR扩增鉴定，对目的片段测序，并与已知序列进行同源性比较，结果表明成功克隆了M基因(1095bp)。将M基因克隆至原核表达载体pGEX-6P-1，经酶切鉴定和PCR鉴定，证明成功构建了重组表达载体pGEX-M。将构建好的融合表达载体在IPTG的诱导下在大肠杆菌DH5α中进行表达。融合蛋白GST-M的分子量约为66kD。Western-Blot免疫印迹分析，融合蛋白可与新城疫阳性血清发生特异性反应，说明该重组蛋白有良好的抗原性。 用纯化获得的M蛋白作为包被抗原，用间接ELISA方法对32份血清样本进行了检测，与HI检测方法比较的结果表明，两种方法的检测结果具有相关性。