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以全齿复活线虫(Panagrellus redivivus)和松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)为靶标,对收集到的26个科39种植物进行了杀线虫活性初步筛选,在前期筛选的基础上,针对木兰科植物,扩大筛选了该科7个属22种植物的杀线虫活性,并对广玉兰(Magnoliagrandiflora)、三瓣木兰(Magnolia tripetala)叶的杀线虫活性成分进行了分离和鉴定,取得了以下结果:
1.初步筛选获得6种对全齿复活线虫(P.redivivus),2种对松材线虫(B.xylophilus)48 h致死率达到45%以上的植物。其中,乌桕(Sapium sebiferum)、阳荷(Zingiberstriolatum)、结香(Edgeworthia chrysantha)、广玉兰(M. grandiflora)均为首次发现具有杀线虫活性。广玉兰(M.grandiflora)表现出较强的杀线虫活性,其叶的乙醇提取物在浓度为5 mg/ml时,48 h对全齿复活线虫(P.redivivus)和松材线虫(B.xylophilus)的致死率分别达到98%和72.6%。
2.针对木兰科植物扩大筛选获得5种对全齿复活线虫(P.redivivus),3种对松材线虫(B.xylophilus)48 h致死率达到45%以上的植物。其中三瓣木兰(M. tripetala)叶的乙醇提取物活性最强,在浓度为5 mg/ml时,48 h对全齿复活线虫(P.redivivus)和松材线虫(B.xylophilus)的致死率分别达到97.6%和99.8%;香子含笑叶(Michelia hedyosperma)活性次之,其提取物48 h对全齿复活线虫(P.redivivus)和松材线虫(B.xylophilus)的致死率分别为97.6%和66.4%。这些植物的杀线虫活性均为首次报道。
3.经过活性测定,确定广玉兰(M. grandiflora)和三瓣木兰(M. tripetala)提取物的杀线虫活性部位都在乙酸乙酯相。采用活性追踪分离,通过硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱反复层析,从广玉兰(M. grandiflora)叶的提取物中分离得到活性化合物1,经鉴定其结构为4,5-epoxy-1(10)E,11(13)-germacradien-12,6-olide。从三瓣木兰(M. tripetala)叶的提取物中分离得到活性化合物2,根据波谱数据确定其为honokiol。化合物1为新化合物。
4.活性测定表明:化合物1、2对供试的两种线虫都具有较强致死活性。化合物1对全齿复活线虫(P.redivivus)和松材线虫(B.xylophilus)的致死中浓度(LC<,50>)分别为46.2和71.4 ppm。化合物2对全齿复活线虫(P.redlvivus)和松材线虫(B.xylophilus)的致死中浓度(Lc50)分别为17.2和25.4 ppm。对照阿维菌素对松材线虫(B.xylophilus)有强的毒杀作用,致死中浓度(LC<,50>)为0.204 ppm,但在浓度为200 ppm时对全齿复活线虫(P.redivivus)无活性。