以叶酸-BSA为载体的靶向量子点的制备及细胞毒性研究

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量子点(Quantum Dots,QDs)作为一种新型的生物荧光标记物,已经引起了生物医学领域研究方法和手段的深刻变革。与传统的有机荧光染料相比,荧光量子点具有宽而连续的激发光谱,发射光谱可控且窄而对称,较大的Stockes位移,吸光系数大,荧光量子产率高,抗光漂白性能强,具有空间兼容性,可用于多光子荧光显微成像,这些独特的荧光特性使得量子点具有取代传统有机染料,作为新型生物荧光探针的深远潜力。  叶酸-叶酸受体靶向就是近来备受关注的新型抗肿瘤机制,它是利用叶酸受体在某些肿瘤部位过度表达、而在正常组织中低水平表达的特征而实现叶酸偶联药物的靶向输送。基于叶酸受体的表达特征和叶酸配体的独特优势,叶酸受体已成为肿瘤诊断和治疗的理想靶点。  本文结合叶酸介导靶向输送的理念和量子点作为荧光探针优异的光学特性,设计合成了叶酸介导的靶向性荧光探针—叶酸-BSA-CdTe QDs。首先采用水相合成法,在水溶液中一步合成了水溶性CdTe量子点,并对其光谱吸收、荧光强度及粒径分布进行了表征,同时考察了反应时间、稳定剂及pH值对量子点光学性质的影响。以白蛋白作为载体材料,通过叶酸活性酯和白蛋白上的氨基反应,制得叶酸偶联的白蛋白,该偶联物再与水溶性CdTe量子点反应即得靶向性荧光探针,并以Hela子宫颈癌细胞为模型细胞,检测其对细胞的毒性。  结果表明,本方法合成的水溶性CdTe量子点的荧光谱峰对称,没有红色拖尾现象,荧光性能优良;琼脂糖凝胶电泳显示CdTe量子点成功和叶酸-BSA偶联;通过MTT分析,发现叶酸白蛋白量子点对细胞的抑制率要普遍高于未偶联的量子点,认为这是由于叶酸对叶酸受体阳性细胞的靶向作用所致。
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