表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌的中间试验、环境释放试验及我国部分养殖猪种F18受体基因型的检测

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由产类志贺毒素大肠杆菌(Shiga-like toxigenic Escherichia coli, SLTEC)引起的断奶仔猪腹泻(Post-weaning diarrhoea, PWD)和仔猪水肿病(Edema disease, ED)是导致断奶仔猪死亡的重要传染病。该类大肠杆菌的致病性主要与粘附素和肠毒素/类志贺毒素两类毒力因子有关。细菌通过粘附素附着于猪肠道上皮细胞,细菌一旦定居于小肠粘膜上,即开始大量繁殖,并产生大量的毒素或侵入深部,损伤破坏组织引发疾病。引起PWD的大肠杆菌主要产生F4﹝K88﹞和F18两类粘附素,致ED的大肠杆菌可产生F18粘附素,致ED的大肠杆菌另一个显著特点是可产生志贺毒素2变异体(Shiga toxin two variant, Stx 2e)。迄今为止,如何有效预防PWD和ED仍然是有待解决的问题。本研究的目的是通过对本室构建并已完成初步免疫效力研究的表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌在江苏省的中间试验和环境释放试验的研究,评价重组菌对猪的免疫效果及其安全性,为PWD和ED的基因工程疫苗的研制奠定基础。与F4粘附素生物合成有关的基因簇包括10个,其中faeG编码的蛋白FaeG是F4粘附素的主要亚单位蛋白,与菌毛的粘附特性有关;与Ⅰ型菌毛相似,F18也是由多个亚单位组成,现已鉴定的亚单位有A、E、F等,亚单位A(fedA)是F18粘附素的主要结构亚单位;Stx 2e由一分子的A亚单位和五分子的B亚单位的聚合体共同构成,其中B亚单位主要与细胞受体结合有关,具有免疫原性。施慧等人构建的重组菌BL21(pFSFaeG)有效表达了Stx 2e B亚单位基因(stx2e B)、F18菌毛的A亚单位基因(fedA)和F4菌毛亚单位基因(faeG),经SDS-PAGE和
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