牙鲆是我省珍贵的经济鱼类之一,目前在中国北方沿海地区大规模养殖,随着高密度工厂化养殖的迅速发展和海水污染的日益严重,危害养殖牙鲆的各种病原相继出现,这些细菌所引起的大规模暴发病给海水养殖业造成了严重的经济损失。本实验从河北唐山会达水产公司和普林海珍养殖的患腹水病褐牙鲆体内分离致病菌,通过包括革兰氏染色,氧化酶鉴定,微量生化鉴定,药物敏感试验测定等生理生化鉴定方法对该菌进行了鉴定;本试验还根据NCBI上报道的嗜水气单胞菌标准株的16S rDNA序列以及致病性嗜水气单胞菌所含有的气溶素(aer)设计了两对引物,对所分离到的2株疑似菌以及三株标准株进行PCR扩增,均能够扩增出目的条带,经测序后,该菌的16s rDNA的序列,aer序列与标准株同源性分别达到99.8%和95%,与常规细菌鉴定方法所得结果一致,证明该菌为嗜水气单胞菌。本实验将所分离到的嗜水气单胞菌用终浓度为0.2%~0.5%的甲醛对菌体进行灭活,制备了灭活疫苗,并优化灭活疫苗的灭活条件;将制备的灭活疫苗分别注射小鼠和牙鲆,均取得了较为理想的效果,其中小鼠的免疫保护率达到80%,牙鲆的免疫保护率达到70%;采用渗透压差法大规模浸泡免疫牙鲆也取得了很好的效果,浸泡免疫过的牙鲆发病率仅为6%,攻毒后免疫保护率为85%;通过应用间接ELISA方法检测受免动物的抗血清,并将牙鲆的抗血清注射新西兰白兔,从而获得兔抗鱼血清,更便于检测,结果都表明动物体内产生了较高的抗体水平;剖检攻毒后的动物,发现免疫过的动物内脏健康无异样,表明该疫苗安全有效,从而为防治牙鲆腹水症开辟了一条新途径,也为进一步制备其基因工程疫苗奠定了基础。