磁性分子印迹纳米材料的制备及其在大鼠血浆和牛肝菌中的应用

来源 :昆明理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pingpingkama
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分子印迹技术(MIT)是源自材料化学、高分子化学、生物化学等学科的一门交叉技术,具有类似免疫学“抗原-抗体”的作用机理。通过分子印迹技术制备的分子印迹聚合物(MIPs)对目标化合物具有特异性识别,选择性吸附和良好的化学稳定性等优点,已被广泛应用于固相萃取,毛细管电泳,液相色谱,传感器等众多领域。黄酮类化合物中的槲皮素广泛存在于植物的花、果、叶中,具有多种药理作用和生物活性,通常用于预防和治疗肿瘤和心脑血管疾病。野生食用牛肝菌味道鲜美,营养丰富,含有大量的抗氧化剂谷胱甘肽,其含量远高于其他野生食用菌,拥有很高的食用价值和药用功效。本论文采用具有超顺磁性的核壳纳米颗粒作为载体,分别以槲皮素和谷胱甘肽为模板分子,通过表面分子印迹技术分别制备了对模板分子具有特异性识别和选择性吸附的新型磁性分子印迹聚合物(MMIPs)。通过傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、X射线衍射仪(XRD)、透射电子显微镜(TEM)和振动样品磁强计(VSM)对磁性分子印迹聚合物(MMIPs)进行表征,并研究它们对模板分子的吸附性能。本论文主要研究内容和结果如下:一、磁性分子印迹聚合物结合高效液相色谱用于选择性提取与测定大鼠血浆中槲皮素的代谢含量在本研究中,制备了一种新型的磁固相萃取吸附剂,即以Fe3O4@Si O2为载体,槲皮素为模板分子,丙烯酰胺(AM)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,通过表面分子印迹技术制备特异性吸附槲皮素的磁性分子印迹聚合物(MMIPs)。利用傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)等对MMIPs进行表征。通过等温吸附、动力学吸附和选择性吸附实验评价MMIPs的结合性能,结果表明,其饱和吸附容量和吸附时间分别为17.9μmol/g和20 min,且对槲皮素显示出较高的选择性。在优化的条件下,检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为55.327 ng/m L和184.413 ng/m L,回收率和RSD分别为85.34~95.87%和3.36~6.59。我们成功将磁固相萃取与高效液相色谱(MSPE-HPLC-UV)相结合用于大鼠血浆中槲皮素的富集、分离和检测,结果表明大鼠血浆中槲皮素的峰值和半衰期分别为1.5 h(32.310μg/m L)和3 h。本方法简单、快速、高效,可用于复杂基质中槲皮素的分离与检测,同时也为其他天然化学成分的分离与鉴定提供依据。二、磁性分子印迹聚合物结合高效液相色谱选择性分离和测定多种野生食用牛肝菌中谷胱甘肽的含量在本研究中,制备了一种对谷胱甘肽具有特异性吸附的新颖磁性分子印迹聚合物(MMIPs)。基于磁性分子印迹聚合物(MMIPs)作为磁固相萃取的吸附剂,我们将磁固相萃取与高效液相色谱相结合(MPSE-HPLC)用于9种野生食用牛肝菌提取物中谷胱甘肽的分离富集与检测。通过傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)等对磁性分子印迹聚合物(MMIPs)进行表征。此外,通过等温吸附、动力学吸附和选择性吸附实验对磁性分子印迹聚合物(MMIPs)的性能进行研究,结果表明MMIPs对谷胱甘肽具有较高的选择性(kd=245.33 m L/g),吸附时间和饱和吸附量分别为30 min和17.88μmol/g。在优化的条件下,10~300μg/m L浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数R2=0.9997,检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为24.828μg/L和82.760μg/L。加标回收率和RSD分别为93.28~103.03%和2.77~5.11。我们成功将磁固相萃取与高效液相色谱相结合(MSPE-HPLC)应用于9种野生食用牛肝菌提取物中谷胱甘肽的检测,发现黄癞头牛肝菌中谷胱甘肽的含量最高(19.800 mg/g),黑牛肝菌中谷胱甘肽的含量最低(6.791 mg/g)。
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