第一部分心脑血管血栓性疾病发生的主要原因是病理性血栓的形成。病理性血栓和生理性血栓有不同之处,生理性血栓的形成是在无狭窄的血管中完成的,剪切率相对低;而病理性血栓的形成是在局部有狭窄的血管中完成的,剪切率明显升高。病理性高剪切率不仅是诸多病理性因素的结果,也是进一步疾病恶化的原因。目前对病理性高剪切率下的血栓形成特点及影响因素还不是很清楚。我们利用Bio Flux 200在体外观察了不同剪切率下胶原包被介质上形成血栓的特点及影响因素。结果发现,在125-5000 s-1的剪切率范围内,一定时间内,血小板在一定浓度的胶原包被介质上形成的血栓总体积、覆盖面积、血栓个数、每个血栓的体积和覆盖面积随剪切率的增高呈抛物线样改变,在2500 s-1剪切率时最高,而形成的血栓厚度随剪切率的增加而呈线性增高。生理性静脉剪切率下形成散在的血小板黏附,生理性动脉剪切率下形成弥漫而薄的血栓沿着血流方向呈条索状分布,而在病理性高剪切率下形成散在的大而厚的血栓。在病理性高剪切率下血栓易脱落形成栓子,这种脱落与剪切率大小及血栓厚度有关。病理性高剪切率下的血栓形成必需先通过GPIb-v WF-胶原相互作用“抓获”(不稳定黏附)高速流动的血液中的血小板,然后通过αIIbβ3-v WF相互作用“抓牢”(稳定黏附)血小板并活化它,最后再通过αIIbβ3-纤维蛋白原相互作用形成血小板聚集。选择性抑制整合素αIIbβ3外向内信号转导的穿膜肽myr-AC~CRGT可部分地抑制高剪切率5000 s-1、1500 s-1下的血栓形成,而不影响在低剪切率500 s-1、125 s-1下的黏附聚集。剪切率对血小板沉积和激活的促进作用、血小板黏附受体、剪切力对血栓的冲刷作用三者共同作用维系了一个血栓形成与血栓脱落之间的平衡系统。第二部分血小板在心脑血管血栓性疾病中所起的作用已得到公认,选择性地阻断血小板αIIbβ3外向内信号而保留内向外信号途径,可在抗血栓的同时保持基本的止血。已知β3胞内段最后3个氨基酸R760GT762为外向内信号转导所必需,而对内向外信号转导并不重要,但β3胞浆尾段其他氨基酸序列特别是β3上最后8个氨基酸序列T755NITYRGT762和远膜端N756ITY759模序在血小板上对双向信号的影响还不清楚,同时选择性地阻断了外向内信号的血小板在流体剪切率下的黏附情况还不清楚。我们用含β3胞浆段不同截短体(β3-762、β3-Δ759、β3-Δ754、β3-ΔNITY、vector)的高感染效率的逆转录病毒感染β3缺陷(β3-/-)小鼠骨髓造血干细胞后移植入受致死量辐照的小鼠,建立了各种β3胞浆段截短体的骨髓移植转基因小鼠模型,检测了静态下和流体下的双向信号途径。结果提示转基因小鼠血小板的GFP阳性率在1-66%之间,虽然β3表达率在各小鼠之间稍有差异,但我们的结果表明转基因小鼠血小板的功能丧失不是因为β3表达率不同所致,而与β3胞浆尾段序列有关。β3-Δ759内向外信号转导不受影响,而外向内信号损伤,在流体下固相化纤维蛋白原上的黏附受损,但仍保留部分黏附功能;β3-Δ754双向信号转导及流体下的黏附均明显受损;β3-ΔNITY内向外信号转导受损,外向内信号部分受损,流体下仍保留大部分的黏附能力。总之,本研究在血小板上,静态及流体剪切力下,证实了整合素β3远膜端N756ITY759是参与内向外信号转导的一个重要序列;而β3C末端最后三个氨基酸R760GT762是参与外向内信号转导最重要的序列,是潜在的抗血栓靶点。