三七注射液作用于肠道黏膜屏障调节LPS/TLR4通路对CRF大鼠肾脏保护作用的机制研究

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目的:从“肠-肾轴”角度探讨三七注射液作用于肠道黏膜屏障调节LPS/TLR4通路发挥对CRF肾脏保护作用。方法:将60只清洁级SD雄性大鼠,随机分为正常组(n=10)、模型组(n=10)、三七注射液低剂量组(n=10)、三七注射液中剂量组(n=10)、三七注射液高剂量组(n=10)和盐酸贝那普利组(n=10)。正常组大鼠正常饲养,三七注射液组、模型组、盐酸贝那普利组进行单侧输尿管结扎,造模后8周检测大鼠尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,Scr)水平,造模成功后,正常组、模型组均予以生理盐水(10m L/kg·d)腹腔注射给药;三七注射液低、中、高剂量组,分别予以三七注射液(1、2、3g/kg·d)腹腔注射给药,阳性对照组予以盐酸贝那普利5mg/kg·d腹腔注射给药,药物给药干预8周后处死大鼠,并通过内毒素检测和D-乳酸、Western blot、ELISA观察血清内毒素(LPS)、肾肠组织TLR-4蛋白表达及炎症因子TNF-α、IL-6。结果:(1)生化检测结果表明,模型组BUN、Scr水平较正常组上升(P<0.01),而经三七注射液及贝那普利干预后,BUN和Scr水平呈下降趋势,其中三七中剂量组、三七高剂量组及阳性对照组较模型组下降,有统计学意义(P<0.01),提示三七注射液具有降低BUN、Scr水平的作用,以三七中剂量组及三七高剂量组作用显著。(2)ELISA检测结果表明,模型组内毒素和D-LA水平较正常组上调(P<0.05),而经三七注射液和贝那普利干预后,各用药组与模型组相比均有下降趋势,三七中剂量组和阳性对照组均具有统计学意义(P<0.05)。(3)ELISA检测结果表明,模型组TNF-α、IL-6含量高于正常组和治疗组,与正常组比具有统计学意义(P<0.01),各用药组与模型组相比均有下降,三七中剂量组、三七高剂量组和阳性对照组具有统计学意义(P<0.01或P<0.05),其中三七高剂量组与阳性对照组相比无显著差异,但此两组较三七低剂量组TNF-α、IL-6的含量下降。(4)Western blot检测结果表明,与模型组相比较,肾组织和肠组织TLR4蛋白表达的水平在三七治疗组和阳性对照组均下降(P<0.01或P<0.05)。结论:三七注射液可以抑制肾、肠炎症反应,发挥抗肾纤维化作用,其中三七注射液中剂量和高剂量较低剂量肾脏保护作用更显著,而这一保护机制可能与三七注射液作用肠道黏膜屏障调节LPS/TLR4通路对CRF大鼠肾脏发挥保护作用相关。
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