早产儿输血相关性移植物抗宿主相关DNA微卫星位点多态性分析

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目的:通过对早产儿输血后DNA微卫星位点多态性分析,预测早产儿发生输血相关性移植物抗宿主病(TA-GVHD)的危险性。方法:选取2012年3月至2013年3月入住我科的需输注红细胞的20例早产儿,分别在该患儿第一次输血前后采集患儿血液标本,输血后采集时间分别为输血后第5天、第10天、第15天抽取患儿静脉血1-2ml EDTA管保存;同时留取所输注非辐射少白红细胞2m1EDTA管保存,保存于-20℃冰箱中备测。对留取的血液标本进行DNA提取,选取三个微卫星位点(D6S89.TCFIID、D11S534),分别进行PCR、琼脂糖凝胶电泳,进行输血前后及DNA微卫星位点多态性分析。结果:①比较20例患儿D6S89、TCFIID两个微卫星位点基因型输血前后无改变。D11S534微卫星位点输血前后比较,20例早产儿中一共有3例早产儿输血后基因型发生改变,同供血者的基因型相同。A早产儿,受血者为纯合子,供血者为杂合子,受血者相同的等位基因与受血者的等位基因之一相同,输血后第5天时受血者基因型无明显改变,输血后第10天及输血后第15天基因型改变,与供血者的基因型相同的杂合子。B早产儿,受血者为纯合子,供血者为杂合子,受血者相同的等位基因与受血者的等位基因之一相同,输血后第5天、第10天及输血后第15天基因型改变,与供血者的基因型相同的杂合子。C早产儿,受血者为杂合子,供血者为纯合子,其相同的等位基因与受血者的等位基因之一相同,输血后第5天时受血者基因型无明显改变,输血后第10天及输血后第15天基因型改变,与供血者的基因型相同的纯合子。②比较不同胎龄(≤32周组和>32周组)、不同体重(≤1500g组和>1500g组)及输注非辐照血后第一次采血前输血量不同的两组(10ml/kg组和20ml/kg组)早产儿发生D11S534多态性改变的发生率,统计学分析显示P值均<0.05,差异有显著性统计学意义结论:①早产儿输注未辐照的少白红细胞后存在暂时性的DNA微嵌合状态,有发生TA-GVHD的风险性。②胎龄越小、出生体重越低、输注同一供血者的输血量越大发生TA-GVHD的风险越高。提倡早产儿输注辐照红细胞预防TA-GVHD的发生。
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