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目的：观察黄荆子乙酸乙酯提取物（the acetoacetate extract ofVitex negundo seed,Evn-50）对于体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞（human pterygium fiborblasts,HPF）增殖的影响，寻找药物辅助治疗和预防术后翼状胬肉复发的新途径。方法：取临床手术切除的人翼状胬肉标本无菌条件剪成1×1×1mm~3组织块，采用组织块双酶消化法（胰蛋白酶和胶原酶）原代培养人翼状胬肉成纤维细胞，传至第3或4代时，以抗α-SMA蛋白抗体行免疫荧光染色，结合细胞学形态鉴定为人翼状胬肉成纤维细胞。用0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml的Evn-50作用于体外培养的HPF,同时设不加药的阴性对照组，48h后观察Evn-50对HPF细胞形态的改变，免疫荧光法检测HPF中细胞增殖核抗原（Ki-67）的变化，流式细胞仪测定细胞周期时相变化。结果：（1）体外培养的细胞倒置相差显微镜可见细胞形态一般为长梭形，胞核位于细胞中央，呈椭圆形；经免疫荧光染色后，α-SMA表达阳性，可以鉴定为成纤维细胞。（2）Evn-50作用48h后，流式细胞仪检测结果发现，随着Evn-50浓度增大，翼状胬肉成纤维细胞发生周期阻滞，大量的细胞停留在G0/G1期，而S期，G2/M期的细胞逐渐减少。计算其增殖率（S%+G2/M%），结果表明细胞增殖能力下降。（3）Evn-50作用48h后，免疫荧光法检测HPF中Ki-67表达发现当Evn-50的浓度在l-4μg/ml范围内能呈浓度依赖性地抑制HPF表达细胞增殖核抗原（Ki-67）(P<0.05)。结论:黄荆子乙酸乙酯提取物能抑制HPF的增殖，流式细胞仪检测显示Evn-50阻滞细胞在DNA合成前期（G0/G1期）。