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【目的】阐明adipophilin(ADRP)在LPS诱导细胞分泌炎症因子过程中的效用,探讨adipophilin(ADRP)与M1型巨噬细胞的关系。【方法】首先,观察LPS处理的RAW264.7巨噬细胞中adipophilin(ADRP)的表达改变情况,用Western blot检测细胞内Arg-1、iNOS和adipophilin(ADRP)的蛋白含量,ELISA检测细胞上清液中促炎因子IL-6、MCP-1、TNF-α的分泌状况;然后,分别用TLR4特异性拮抗剂TAK242和AP-1的抑制剂curcumin预培养RAW264.7细胞6小时后,用150ng/mlLPS培养细胞,Western Blot检测细胞内TLR4、AP-1、adipophilin和iNOS蛋白含量,ELISA检测上清液中IL-6、MCP-1、TNF-α增减情况;最后,利用逆转录病毒载体转染质粒技术,构建稳定沉默adipophilin()表达的RAW264.7细胞模型,加入诱导因素LPS后,用上述措施检测关联蛋白和炎性因子分泌情况。【结果】当用不同浓度LPS培养RAW264.7巨噬细胞6小时,adipophilin蛋白表达呈浓度依附性的增高,挑选出细胞毒性最低浓度150ng/ml;LPS培养RAW264.7巨噬细胞差异时间后adipophilin蛋白表达呈现先上升后下降的趋势,且在6小时达到最大值,同时,炎症因子IL-6、MCP-1、TNF-α的浓度变化状况与adipophilin类似,先增加后降低,在6小时时达到峰值;当用TLR4特异性拮抗剂TAK242处理细胞后,与未抑制组相比,抑制组中AP-1、adipophilin蛋白表达和炎症因子IL-6、MCP-1、TNF-α的浓度都显著减少;而当用AP-1特异性抑制剂curcumin处理细胞后,与未抑制组相比,TLR4活性并无明显变化,但adipophilin蛋白表达和炎症因子IL-6、MCP-1、TNF-α的浓度都明显增加;将LPS加入沉默adipophilin细胞中培养时,与未沉默组相比,TLR4的活性和AP-1蛋白的表达都无显著变化,然而炎症因子IL-6、MCP-1、TNF-α浓度却显著降低。此外,在整个实验过程中,检测到adipophilin与M1型巨噬细胞的标志物TNF-α和iNOS的变化情况相差无几,但在加入TLR4拮抗剂时iNOS并无显著变化。【结论】LPS通过TLR4-AP-1上调adipophilin的表达,进而促进炎性因子IL-6、MCP-1、TNF-α的分泌。