GPI(glycosylphosphatidylinositol)锚定蛋白是一类由蛋白质、脂质和糖链共价结合的复杂糖复合物,参与免疫识别、细胞通讯、信号转导等多种生理过程。某些GPI锚定蛋白还与肿瘤的侵袭和生长以及克雅氏病、牛海绵状脑病等疾病形成有关。目前的研究多集中于细胞膜表面的GPI锚定蛋白,而外泌体作为一种内体起源的细胞外囊泡,调节包括免疫反应和炎症、肿瘤生长等在内的许多病理生理过程,其表面的GPI锚定蛋白同样具有很大研究价值。CD24是一种大量糖基化修饰,而且在肿瘤和癌症中过表达的GPI锚定蛋白,德国海德堡癌症研究中心的一项研究表明,CD24可以作为外泌体标志物来检测检测外泌体。有报道指出,外泌体有作为疾病治疗工具和生物标记物的巨大潜力,但是确切的诊断靶点有待进一步研究。目前,GPC1等癌症诊断标记物并不一定适用于外泌体,所以急需新的靶点来诊断癌症。本课题以肺癌GPI锚定蛋白为研究重点,通过DIA定量技术,对人非小细胞肺癌细胞外泌体蛋白进行定量,然后与GPI锚定蛋白在肺癌病人体内的表达数据共同分析,希望能够找到可以作为肺癌诊断标记物的GPI锚定蛋白。为了找到可作为肺癌诊断标记物的GPI锚定蛋白,本文利用TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库,从肺癌病人和健康人的mRNA阵列数据中筛选到114种GPI锚定蛋白,其中43种存在显著表达差异。然后以细胞膜总蛋白为对照,使用DIA(Data Independent Acquisition)定量技术对NCI-H838人非小细胞肺癌细胞外泌体蛋白进行定量分析,共筛选出15个外泌体GPI锚定蛋白。利用NCI-H838细胞外泌体GPI锚定蛋白数据和肺癌病人体内的GPI锚定蛋白数据一起进行筛选,最终获得MSLN(mesothelin)、CPM(carboxypeptidase M)、SMPDL3B(sphingomyelin phosphodiesterase,acid-like 3B)、HYAL2(hyaluronoglucosaminidase 2)、EFNA5(ephrin-A5)、RECK(reversion-inducing-cysteine-rich protein with kazal motifs)和GPC1(glypican 1)等7种在外泌体高表达,且可作为肺癌诊断标记物的GPI锚定蛋白。