帕金森病（PD）是主要发生在中老年人锥体外系统的进行性神经变性疾病。病理已证实它是由于黑质中的多巴胺神经元选择性损害，导致多巴胺和其它／乙茶酚胺神经递质缺乏所引起的。临床上多用多巴胺替代疗法，但长期疗效并不满意，且目前对PD病因的认识仍不清楚。因此，探讨PD的发病机制及寻找有效的治疗方案已成为神经科学领域中研究的重要内容。 近年来，一种位于突触前膜、囊泡膜及神经胶质细胞膜上的糖蛋白—神经递质转运体逐渐成为神经科学界研究的热点。转运体失调学说能较好地解释多巴胺能神经元选择性缺失的机制。对多巴胺毒性作用机制的研究以及能产生实验性PD模型的毒物如6-羟多巴胺、MPTP代谢产物MP旷的研究已集中在多巴胺能神经元两种转运体上—神经元细胞膜上多巴胺转运体（DAT）、细胞囊泡膜上单胺囊泡转运体（VMAT₂）。DAT可将外源性毒物MPTP运到细胞质内，在那儿合成MPP⁺，而多巴胺无需DAT就可进入细胞质内，在那儿它被氧化产生高活性的苯醌和过氧化基团等有毒物质，提示多巴胺可对神经元产生毒性作用。而VMAT₂可将MPP⁺、多巴胺等毒物运入亚细胞小室（囊泡内），从而使其不能对囊泡外的细胞物质产生毒性作用，由此可见VMAT₂对于防止PD病的恶化，改善其预后具有重要的意义。 本课题通过对转基因的中国仓鼠卵细胞（cDNA CHO细胞）中VMAT₂抗1—甲基-4—苯基吡啶离子（MPP⁺） 南京医科大学硕士学住论文毒性作用及其机理的研究，验证 VMAT。功能改变在 PD友病机制中的作用及机理。 本研究分为二部分：1、利用转染大鼠嗜铬细胞瘤细胞株（PC，）田胞基因至野生株 CHO（中国仓鼠卵兰胞）细胞中形成的CDNACHO（其中含有VMAT。人采用MTT比色法检测MPP“对CNO 细胞野生株（MCNO）和CDNACHO细胞的毒性作用，并观察利血平—一VMAT。的特异性阻滞剂对MPP”毒性作用的影响。2、用流式细胞仪检测含有 VMAT；的 CDNACHO和 WtCHO在不同tvP浓度下的细胞凋亡数，以及加入利血平后细胞凋亡数的 变化。 结果：l、在 0．smM MPP”以上浓度 cDNACHO细胞对MPP”敏感性比tCHO低的多二 CDNACHO和tCHO对鱼藤酮卜胞线粒体电子转运体特异性阻滞剂rotenon）的敏感性无显著差异Z 加入＊MAT／特异性阻滞剂利血平后，上述保护作用消失，而单独予以Wt＊＊O细胞利血平则不能改变它对低浓度 MPPk 敏感性。2、当MI小“。0．lmM CDNACHO凋亡数变化不显著。WtCHO 65凋亡数随＊P浓度增加而明显增加。加入利血平后，WtCHO、CDNACHO的凋亡数与未力。牙IJ血平的 WtCHO变化才 同。 结论：1、含有＊＊AT／转基固细胞对＊呷”诱导的细胞毒性具有桔抗作用；这种保护机制是由转基因细胞中的vuM。引起的，vu肌将en”转运至囊泡内，，x而保护细胞；2、从另一个方面也提示 PC；／胞内具有抗毒性作用的成分。