子宫内膜组织的周期性改变和胚胎着床都是一个受多种因素共同调控的、复杂的网络过程。目前临床上通常采用超声观察子宫内膜形态与厚度、测定血清雌、孕激素水平等方法评价子宫内膜对胚胎的接受性。但这些方法存在一定局限性，不能连续、动态和完整地反映子宫内膜组织形态与功能转化以及对胚胎接受能力的预测。子宫内膜组织学改变与功能转化也不完全一致。这在一定程度上也解释了为什么一部分患者，即使子宫内膜形态良好，反复移植优质胚胎仍然不能获得胚胎着床。 月经周期中子宫内膜组织随卵巢甾体激素水平变化而表现出相应的形态学与功能转化，尤其在“种植窗期”前、后的改变是胚胎能否成功着床的必要条件之一。本文通过研究：1)月经周期中人在体子宫内膜组织AnnexinⅣ和StAR基因与蛋白质表达的变化规律，结合组织学改变探讨其在子宫内膜功能转化过程中的作用；2)采用体外子宫内膜细胞培养模型，探讨hCG对AnnexinⅣ和StAR蛋白表达的调控作用及其机制。 第一部分子宫内膜组织 AnnexinⅣ和StAR的周期性表达 研究目的： 生育力正常妇女月经周期子宫内膜组织AnnexinⅣ和StAR基因与蛋白表达。 研究方法： 通过组织微创活检分别获取月经周期中增殖早、中、晚期和分泌早、中、晚期子宫内膜标本共22例。样本共分为三部分，一部分用于制备石蜡组织切片，采用免疫组化方法进行AnnexinⅣ和StAR蛋白质的定位表达；剩余部分分别用于提取总蛋白样品和总RNA样品，进行Western blot蛋白质半定量分析和RT—PCR法mRNA半定量分析。 研究结果： 1.正常月经周期中，AnnexinⅣ蛋白和StAR蛋白在人类子宫内膜均有表达。AnnexinⅣ蛋白主要定位于腺上皮和腔上皮细胞，以胞膜表达为主；StAR蛋白主要定位于基质细胞，以胞浆表达为主。 2.AnnexinⅣ mRNA和蛋白质半定量分析：月经周期中EPP、MPP、LPP、ESP、MSP和LSP各期mRNA相对灰度值分别是8.34±1.85，7.79±2.17，10.39±3.28，14.03±4.9，14.62±3.57，10.03±3.39。蛋白质相对灰度值分别是1.57+0.54，1.60±0.48，2.13±0.75，2.69±0.98，3.16±0.94，2.27±0.54。MSP期mRNA和蛋白质均显著高于其它时期，P<0.05，有统计学意义。 3.StAR mRNA和蛋白质半定量分析：月经周期中EPP、MPP、LPP、ESP、MSP和LSP各期mRNA相对灰度值分别是0.72±0.12，0.76±0.15，0.86±0.39，0.94±0.13，1.49±0.32，1.00±0.32；蛋白质相对灰度值分别是0.20±0.04，0.23±0.03，0.27±0.07，0.30±0.07，0.32±0.03，0.26±0.03。MSP期mRNA和蛋白质均显著高于其它时期，P<0.05，有统计学意义。 第二部分 hCG对RL95-2细胞AnnexinⅣ和StAR表达的调控研究 研究目的： 1.LH/hCG—R、AnnexinⅣ和StAR在RL95-2细胞系的表达。 2.hCG对RL95-2细胞系AnnexinⅣ和StAR表达的调控作用和机制。 研究方法： 1.体外培养RL95-2细胞系，通过免疫荧光法对LH/hCG—R、AnnexinⅣ和StAR蛋白质进行细胞定位表达。 2.采用RT—PCR和Western blot法测定hCG预处理的RL95-2细胞AnnexinⅣ和StAR mRNA与蛋白质水平。 2.测定MAPK通路阻断剂PD98059处理后再添加hCG培养的RL95-2细胞AnnexinⅣ和StAR mRNA与蛋白质水平。 结果： 1.AnnexinⅣ半定量分析：hCG预处理前、后比较，RL95-2细胞AnnexinⅣmRNA表达量分别为0.057±0.022和0.073±0.036，P>0.05。无统计学意义 2.StAR半定量分析：hCG预处理前、hCG预处理后和PD98059阻断后三组细胞StAR mRNA与蛋白质表达分别是2.13±0.15，4.54±1.51，2.61±0.52和1.17±0.04，1.94±0.19，1.11±0.17。与对照组相比，hCG预处理后RL95-2细胞mRNA和蛋白表达水平显著升高，P=0.019和0.045；PD98059阻断后表达无显著差别，P=0.1和0.37，无统计学意义。 结论： 1：月经周期人子宫内膜组织存在AnnexinⅣ和StARmRNA及蛋白质的周期性表达，其中分泌期的表达明显高于增殖期。 2：RL95-2细胞存在LH/hCG—R、StAR与AnnexinⅣmRNA和蛋白质表达；hCG与LH/hCG—R结合可上调StAR表达水平，MAPK通路抑制剂可阻断hCG对StAR调控作用。hCG对AnnexinⅣ的表达无显著影响。