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目的:人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）感染是宫颈癌发生的必要条件,而阴道菌群已是HPV感染自然史中的新变量,可以极大地影响HPV感染、感染后转归及其相关宫颈病变的发生,尚不清楚阴道细菌在宫颈HPV感染中的作用及其分子机制;三棱内酯B（Sparstolonin B,Ssn B）作为TLR2/4拮抗剂具有强效抗炎作用,尚不清楚其在HPV感染中的作用。本研究主要目的:1)了解本地育龄期女性HPV感染的阴道菌群特征及差异细菌;2)探索阴道细菌代谢物及三棱内酯B是否通过TLR/NF-κB/Smad6影响宫颈上皮细胞HPV易感性。方法:1)选取2021年4月-2021年10月在乌鲁木齐市妇幼保健院妇科门诊就诊自愿参与研究的育龄期女性,用16S r DNA扩增子技术检测阴道分泌物中细菌V3-V4区序列,用QIIME2和R软件分析比较组间菌群多样性、构成和差异细菌,并对HPV疫苗接种状态和感染型别分亚组分析。2)根据第一部分研究结果选择与HPV感染相关的菌属代表菌,培养卷曲乳杆菌（Lactobacillus crispatus,LC）、阴道加德纳菌（Gardnerella vaginalis,GV）和阴道阿托波菌（Atopobium vaginalis,AV）标准菌株,分别获取上清液干预Hcer Epic细胞,用细胞增殖活性检测试剂盒（cell counting kit 8,CCK-8）检测确定合适浓度进行后续实验;实验分为四组:对照（Control）组、LC上清液（LCS）组、GV上清液（GVS）组、AV上清液（AVS）组,显微镜下观察细胞形态变化,酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测上清液中白介素（interleukin,IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumour necrosis factor,TNF-α）和多配体蛋白聚糖1（Syndecan 1,SDC-1）的浓度,用流式细胞检测细胞表面SDC-1的表达量,聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）和蛋白免疫印迹（Western Blot,WB）检测TLR4、TLR2、NF-κB、Smad6和SDC-1 m RNA和蛋白表达水平。3)选择第二部分研究中SDC-1表达明显变化的实验组,用三棱内酯B预处理GVS组、AVS组,实验分为五组:Control组、GVS组、AVS组、GVS+Ssn B组、AVS+Ssn B组,细胞形态变化的观察,上清液中炎性因子和SDC-1的浓度及细胞表面SDC-1的表达量的检测方法同2),PCR检测SDC-1 m RNA相对表达水平,WB检测相关蛋白表达水平。结果:1)共纳入101例（对照组43例,HPV感染组58例）参与者,育龄期女性阴道菌群以乳杆菌属为主,HPV感染组（P组）阴道菌群chao1指数、observed-OTUs指数和shannon指数均显著高于对照组（N组）（P＜0.05）,beta多样性在组间无显著差异（P＞0.05）;两组菌群结构在细菌各水平有差异:在门水平,N组厚壁菌门丰度显著高于P组（P=0.001）,放线菌门富集于P组（P=0.003）;在属水平,乳杆菌属在N组的丰度更高（P＜0.001）;阴道加德纳菌在P组的丰度更高（P=0.001）;丰度排名前三的菌属分别是乳杆菌属、加德纳菌属、阿托波菌属;细菌表型功能预测P组厌氧菌和生物膜形成表型丰度显著高于N组（P＜0.05）,N组的需氧菌和移动元件含量表型丰度更高（P＜0.05）。亚组分析显示疫苗接种组与未接种组相比,两亚组阴道菌群的多样性和结构变化无显著差异（P＞0.05）;糖细菌Saccharimonadales在HPV16/18感染亚组显著富集（P＜0.05）。2)CCK-8结果显示,LCS对Hcer Epic细胞有促增殖作用,并在30%浓度时最显著（P＜0.001）,GVS和AVS有一定细胞毒性,在40%浓度时抑制生长作用明显（P＜0.01）,选择30%LCS、40%GVS、40%AVS进行后续实验。与Control组相比,三株阴道细菌代谢物均明显上调了Hcer Epic细胞IL-1β、IL-6、TNF-?的表达（P＜0.05）;GVS组和AVS组的膜型SDC-1表达明显下降（P＜0.01）,而细胞上清液中SDC-1明显增加（P＜0.0001）;LCS组的SDC-1表达无明显变化（P＞0.05）。与Control组相比,TLR2、TLR4、NF-κB、Smad6的转录表达和蛋白表达在GVS组和AVS组显著上调（P＜0.05）,SDC-1的转录水平下调（P＜0.01）;在LCS组蛋白表达无显著变化（P＞0.05）。3)三棱内酯B明显改善了GVS或AVS处理的Hcer Epic细胞的形态变化,下调了GVS或AVS诱导的RIP3、Cleaved Caspase-3的表达水平（P＜0.05）和IL-1β、IL-6、TNF-?的分泌（P＜0.05）;三棱内酯B下调了GVS或AVS诱导的TLR2、TLR4、p-NF-κB、Smad6蛋白表达水平（P＜0.05）;显著上调了SDC-1 m RNA水平（P＜0.01）和膜型SDC-1的表达（P＜0.01）,减少了细胞上清液中的SDC-1（P＜0.05）;还明显改善了GVS或AVS诱导的ZO-1和Occludin表达减少（P＜0.01）。结论:1)HPV感染女性阴道菌群的alfa多样性显著增加,以乳杆菌属相对丰度下降和加德纳菌属和阿托波菌属等厌氧菌属的相对丰度升高为特点,阴道加德纳菌是两组间的差异菌种。本研究显示疫苗接种状态与阴道菌群的多样性和结构变化不相关,Saccharimonadales的检出可能与HPV16/18感染相关。2)GVS和AVS对细胞的形态改变和活力抑制明显,GVS和AVS抑制了SDC-1的转录水平和膜型蛋白的表达,促进了SDC-1的脱落,可能与上调的TLR2/TLR4/NF-κB/Smad6有关;LCS对SDC-1的表达和通路蛋白无显著影响。3)GVS和AVS通过TLR2/TLR4/NF-κB/Smad6通路促进SDC-1的脱落和上皮细胞屏障损伤,增加了Hcer Epic细胞HPV易感性。三棱内酯B可改善GVS或AVS对Hcer Epic细胞造成的炎性损伤和细胞死亡,通过减少SDC-1的脱落和改善上皮细胞屏障功能,降低由GVS或AVS诱导的Hcer Epic细胞HPV易感性,三棱内酯B具有预防HPV感染的潜力,这为其临床转化研究提供了理论依据。