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目的:观察益气解毒消瘿方对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠（EAT）脾脏单个核细胞（PMBC）Th17、Treg比率，Th17、Treg调控基因RORγt、Foxp3表达，甲状腺自身抗体（TGAb、TPOAb）水平、细胞因子（TGF-β、IL-6、IL-10、IL-17）水平的调节作用，初步探讨益气解毒消瘿方调节EAT大鼠Th17/Treg免疫失衡的作用机制，为中医药治疗自身免疫性甲状腺炎（AITD）提供可靠的实验依据。
方法:选用SPF级Wistar大鼠60只，取10只作为正常组，其余50只（采用猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂混合，多点皮下注射的方法）造模成EAT。造模成功的48只大鼠随机分为模型组、亚硒酸钠对照组、益气解毒消瘿方低剂量治疗组、益气解毒消瘿方高剂量治疗组，每组12只。分别给予双蒸水、亚硒酸钠、益气解毒消瘿方合剂灌胃8周。实验结束采用流式细胞技术检测大鼠脾脏调节性T细胞（Treg）和辅助T细胞17（Th17）比率。HE染色法观察EAT大鼠甲状腺细胞形态学变化，免疫组化观察甲状腺RORγt、Foxp3蛋白表达，酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠脾脏IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β细胞因子水平，实时定量RT-PCR法检测大鼠甲状腺组织中RORγt、Foxp3、stat3、stat5mRNA的表达。统计方法：数据均采用SPSS22.0进行统计分析。计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用方差分析,计数资料采用卡方分析。P＜0.05有统计学意义。
结果:1.EAT大鼠模型组血清甲状腺抗体水平明显高于正常组大鼠。治疗8周后，高、低剂量中药组、西药组大鼠血清甲状腺抗体水平均有所下降。高、低剂量中药组优于西药组，高、低剂量中药组具有剂量效应关系。
2.在正常组的EAT大鼠中，甲状腺滤泡形态完整，滤泡内充满胶质，滤泡上皮呈立方状。未见炎性细胞浸润。模型组甲状腺滤泡被广泛破坏，结构不完整。甲状腺内可见大量淋巴细胞浸润。西药组甲状腺较模型组好转，部分滤泡结构恢复，淋巴细胞浸润减少。高、低剂中药量组大部分滤泡结构恢复，淋巴细胞浸润减少，高剂量组优于低剂量组。
3.EAT大鼠脾脏PMBC中Treg明显降低，Th17明显升高，Th17/Treg比值升高。亚硒酸钠西药组和中药高低剂量组能显著升高Treg，降低Th17比率，降低Th17/Treg比值。中药组优于西药组，具有量效关系。
4.EAT大鼠模型组甲状腺与正常组比较Foxp3表达减低，RORγt表达增高。治疗后，西药组和中药高低剂量组Foxp3表达升高，RORγt表达降低。中药组优于西药组，具有量效关系。
5.EAT大鼠模型组血清与正常组比较IL-17、IL-6、TGF-β水平升高，IL-10水平降低。治疗后，西药组和中药高低剂量组IL-17、IL-6水平降低，IL-10、TGF-β水平升高。中药高剂量组优于西药组、中药低剂量组。
6.模型组大鼠脾脏组织stat5、foxp3mRNA与对照组相比明显下调；与模型组相比，中药高剂量组与中药低剂量组stat5、foxp3mRNA均明显上调，西药组stat5、foxp3mRNA表达上调不明显，无统计学差异；中药组与西药组相比差异有统计学意义。模型组大鼠脾脏组织rorγt、stat3mRNA与对照组相比明显上调，与模型组相比，中药高剂量组、中药低剂量组rorγt、stat3mRNA表达均明显下调；中药组与西药组相比，差异有统计学意义。
结论:益气解毒消瘿方能降低EAT大鼠甲状腺自身抗体（TGAb、TPOAb）水平，改善EAT大鼠的甲状腺病理改变，调节EAT大鼠的Th17/Treg免疫失衡。其机制是通过调控EAT大鼠甲状腺基因RORγt、Foxp3的表达、调节细胞因子（TGF-β、IL-6、IL-10、IL-17）的水平来实现的。
方法:选用SPF级Wistar大鼠60只，取10只作为正常组，其余50只（采用猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂混合，多点皮下注射的方法）造模成EAT。造模成功的48只大鼠随机分为模型组、亚硒酸钠对照组、益气解毒消瘿方低剂量治疗组、益气解毒消瘿方高剂量治疗组，每组12只。分别给予双蒸水、亚硒酸钠、益气解毒消瘿方合剂灌胃8周。实验结束采用流式细胞技术检测大鼠脾脏调节性T细胞（Treg）和辅助T细胞17（Th17）比率。HE染色法观察EAT大鼠甲状腺细胞形态学变化，免疫组化观察甲状腺RORγt、Foxp3蛋白表达，酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠脾脏IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β细胞因子水平，实时定量RT-PCR法检测大鼠甲状腺组织中RORγt、Foxp3、stat3、stat5mRNA的表达。统计方法：数据均采用SPSS22.0进行统计分析。计量资料以均数±标准差表示,组间比较采用方差分析,计数资料采用卡方分析。P＜0.05有统计学意义。
结果:1.EAT大鼠模型组血清甲状腺抗体水平明显高于正常组大鼠。治疗8周后，高、低剂量中药组、西药组大鼠血清甲状腺抗体水平均有所下降。高、低剂量中药组优于西药组，高、低剂量中药组具有剂量效应关系。
2.在正常组的EAT大鼠中，甲状腺滤泡形态完整，滤泡内充满胶质，滤泡上皮呈立方状。未见炎性细胞浸润。模型组甲状腺滤泡被广泛破坏，结构不完整。甲状腺内可见大量淋巴细胞浸润。西药组甲状腺较模型组好转，部分滤泡结构恢复，淋巴细胞浸润减少。高、低剂中药量组大部分滤泡结构恢复，淋巴细胞浸润减少，高剂量组优于低剂量组。
3.EAT大鼠脾脏PMBC中Treg明显降低，Th17明显升高，Th17/Treg比值升高。亚硒酸钠西药组和中药高低剂量组能显著升高Treg，降低Th17比率，降低Th17/Treg比值。中药组优于西药组，具有量效关系。
4.EAT大鼠模型组甲状腺与正常组比较Foxp3表达减低，RORγt表达增高。治疗后，西药组和中药高低剂量组Foxp3表达升高，RORγt表达降低。中药组优于西药组，具有量效关系。
5.EAT大鼠模型组血清与正常组比较IL-17、IL-6、TGF-β水平升高，IL-10水平降低。治疗后，西药组和中药高低剂量组IL-17、IL-6水平降低，IL-10、TGF-β水平升高。中药高剂量组优于西药组、中药低剂量组。
6.模型组大鼠脾脏组织stat5、foxp3mRNA与对照组相比明显下调；与模型组相比，中药高剂量组与中药低剂量组stat5、foxp3mRNA均明显上调，西药组stat5、foxp3mRNA表达上调不明显，无统计学差异；中药组与西药组相比差异有统计学意义。模型组大鼠脾脏组织rorγt、stat3mRNA与对照组相比明显上调，与模型组相比，中药高剂量组、中药低剂量组rorγt、stat3mRNA表达均明显下调；中药组与西药组相比，差异有统计学意义。
结论:益气解毒消瘿方能降低EAT大鼠甲状腺自身抗体（TGAb、TPOAb）水平，改善EAT大鼠的甲状腺病理改变，调节EAT大鼠的Th17/Treg免疫失衡。其机制是通过调控EAT大鼠甲状腺基因RORγt、Foxp3的表达、调节细胞因子（TGF-β、IL-6、IL-10、IL-17）的水平来实现的。