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MARVELD1（MARVEL domain containing1）是本课题组新近发现的一个抑癌基因，在多种肿瘤组织和肿瘤细胞中表达下调。课题组miRNA芯片表达谱分析发现，当MARVELD1表达变化时，许多miRNAs也随其发生变化，其中hsa-miR-186和hsa-miR-335的表达存在显著性的差异。但是，关于MARVELD1调控hsa-miR-186和hsa-miR-335的表达的研究，尚未得到验证，而且其具体调控机制也无从获知。因此，本课题对MARVELD1调控has-miR-186和has-miR-335的表达方式进行了初步的探讨。 在肺癌细胞中，运用实时定量逆转录PCR的方法发现 MARVELD1与hsa-miR-186、hsa-miR-335的表达呈现明显的正相关。在外源性表达MARVELD1的A549细胞和HepG2细胞中分析显示，当MARVELD1过表达之后，hsa-miR-186和hsa-miR-335的表达均表现为上调；进一步在内源性表达 MARVELD1的NCI-H520细胞和HeLa细胞中应用shRNA干扰 MARVELD1表达之后，其正相关性也获得了证实。 为分析MARVELD1与hsa-miR-186和hsa-miR-335的关系，本研究首先对hsa-miR-186和hsa-miR-335进行了定位分析，结果显示hsa-miR-186和hsa-miR-335都为内含子miRNA，其宿主基因分别为ZRANB2和MEST。对此本研究分析了MARVELD1与宿主基因的关系，通过qRT-PCR的实验检测宿主基因ZRANB2和MEST的表达水平，确定MARVELD1可以上调has-miR-186和has-miR-335的宿主基因的表达。为探讨MARVELD1调控内含子has-miR-186和has-miR-335的机制，结合前期实验基础，应用染色质免疫共沉淀技术确定MARVELD1可以与宿主基因启动子区的组蛋白H4K20单甲基化发生相互作用，进而影响宿主基因与内含子has-miR-186和has-miR-335的表达。 本研究进一步应用双荧光素酶报告系统分析hsa-miR-186和hsa-miR-335与其预测靶基因靶向作用关系，并初步确定CHD7可能是hsa-miR-186的靶基因；CHD7和FBXL10可能是has-miR-335的靶基因。 综上所述，本研究确定 MARVELD1通过下调组蛋白H4K20单甲基化，从而使得组蛋白H4K20单甲基化与宿主基因MEST和ZRANB2的启动子DNA作用下降，进而使得宿主基因MEST和ZRANB2的表达上调，导致hsa-miR-186和hsa-miR-335的表达增强。