维生素B12对复发性口腔溃疡家兔血清IL-6及IL-8影响的研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:tianyi666
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目的:利用实验性家兔口腔黏膜组织匀浆加完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)注射方法建立复发性口腔溃疡动物模型,通过检测复发性口腔溃疡(Recurrent oral ulcers,ROU)家兔血清中白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素-8(Interleukin-8,IL-8)表达的变化情况,研究维生素B12对复发性口腔溃疡病变的影响。方法:新西兰家兔57只,实验室适应性喂养一周。其中15只急性猝死取口腔黏膜组织备用,其余42只家兔按随机数字表随机分为2组,分别为空白对照组(11只)、模型组(31只)。建模12周结束后,按随机数字法,随机选择空白对照组、实验组家兔各1只,猝死后切取口腔黏膜制备抗原。建模成功后,将模型组30只随机分为B组(阳性对照组)、C组(左旋咪唑组)、D组(维生素B12组)。模型建立后A组(空白对照组)和B组采用蒸馏水灌胃,C组采用左旋咪唑片灌胃,D组采用维生素B12灌胃,连续灌胃两周,观察记录实验期间家兔口腔溃疡的变化,灌胃结束后组织病理切片HE染色后光镜下观察。耳缘静脉采血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组家兔灌胃结束后血清中IL-6、IL-8的含量。结果:1.B、C、D组以口腔黏膜组织匀浆+完全弗氏佐剂作为抗原的实验组家兔均出现口腔黏膜充血,部分出现糜烂,血清中抗口腔黏膜抗体均表现阳性。组织病理切片HE染色后光镜下观察,可见上皮连续性破坏,上皮内有密集的炎性细胞浸润,固有层可见淋巴细胞、中性粒细胞浸润,毛细血管充血扩张,部分可见腺体增生。ROU模型建立过程中家兔体重和摄食量变化均明显异于A组。B、C、D组灌胃结束后,切取各组溃疡组织,进行常规HE染色,病理学观察,B组黏膜表面连续性破坏,且有假膜覆盖,上皮内有密集的淋巴细胞、单核细胞浸润,固有层炎症细胞大量浸润,毛细血管充血扩张,血管内皮细胞肿胀,部分可见坏死区。C组和D组溃疡面愈合,上皮完整增厚,黏膜下为疏松结缔组织,可见新生毛细血管。2.血清结果显示,灌胃结束后,B组与A组比较,B中的IL-6、IL-8含量明显升高,p?0.01,差异具有统计学意义;C组和D组与B组分别比较,两组中的IL-6、IL-8水平明显低于阳性对照组,p?0.01,差异具有统计学意义;D组与C组相比,p>0.05差异无统计学意义。结论:1.采用“同种异体黏膜组织+完全费氏佐剂”的免疫法建立的复发性口腔溃疡模型经肉眼观察、组织病理学检查及补体结合试验,验证模型建立成功。2.维生素B12可以有效的治疗家兔复发性口腔溃疡,并显著降低血清中高水平含量的IL-6、IL-8,可能通过调节机体的免疫功能,从而促进口腔溃疡的愈合。
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