【摘 要】
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目前,种类繁多的转基因作物成为了加工食品原料和动物饲料,转基因检测用的阳性标准品缺乏,我国针对深加工制品的定量检测技术标准尚不完善,动物饲料安全性试验多数限于短期喂
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目前,种类繁多的转基因作物成为了加工食品原料和动物饲料,转基因检测用的阳性标准品缺乏,我国针对深加工制品的定量检测技术标准尚不完善,动物饲料安全性试验多数限于短期喂养观察。本研究旨在给阳性质粒分子的构建、加工品中的转基因成分的定量检测标准建立和饲料安全监测监控提供技术支持。生物信息学方法查找玉米内标基因和转化体序列,采用分子克隆构建了检测转基因玉米成分的质粒分子;对已有的大豆的质粒分子和构建的玉米质粒分子,进行标准液稀释,并进行定量PCR反应,重复三次;采用4种方法提取市场上的加工品(原料为大豆和玉米)DNA;利用质粒分子绘制标准曲线从而定量检测加工品;模拟转基因大豆GTS40-3-2长期喂养大鼠动物模型,对第3代雄性大鼠采用了肝肾功能指标测定、菌群计数、组织切片和定量PCR检测方法探讨转基因成分对其肝肾的毒性作用及残留情况。将9个玉米序列成功克隆到同一个质粒载体分子中;所构建的2种质粒分子具有良好的稳定性,可用作后续定量PCR的标准品;通过比较不同方法,得到了较好的DNA模板;16种检测样品中9种有含量极低的转化体,同种样品最多含有3种转化体;第三代雄性大鼠的转基因实验组和非转基因对照组所检测的指标在统计学上没有发现显著差异,脏器检测后没有发现转基因成分残留。所构建的2种质粒分子能在转基因检测用作阳性物质;用于加工食品的原材料复杂,不同产品提取DNA方法就不一样;初步判定转基因大豆GTS40-3-2对SD大鼠是安全的。
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