包膜病毒侵染细胞是由病毒包膜融合糖蛋白的一系列结构变化触发。杆状病毒出芽病毒粒子(BV)的囊膜顶端存在膜融合蛋白——GP64或F蛋白。已经获得了 GP64的晶体结构,而F蛋白的晶体结构至今仍未被解析。已知GP64蛋白是组Ⅰ型核多角体病毒(group Ⅰ NPV)的膜融合蛋白,属于Class Ⅲ型病毒膜融合蛋白;F蛋白则是组Ⅱ型核多角体病毒(group Ⅱ NPV)与颗粒体病毒(GV)的膜融合蛋白,通过模拟结构特征将F蛋白归类为ClassⅠ型病毒膜融合蛋白。F蛋白先表达出前体F0,之后F0被Furin蛋白酶剪切成F1、F2片段并由二硫键连接装配成具有融合功能的成熟F蛋白。本篇论文以棉铃虫核多角体病毒(Helicoverya armigera single nucleocapsid nucleopolyhedrovirus,HearNPV)的膜融合F蛋白作为研究对象,实验通过果蝇表达系统(DES)S2细胞稳定表达HearNPV F蛋白的膜外结构域HaFect(31-611aa)。利用Ni-NTA亲和层析、MonoQ离子交换层析等纯化蛋白的方法获得了可用于结晶实验的高纯度目的蛋白,并在结晶实验前对目的蛋白进行去糖基化实验以提高其均一性,使之更有利于结晶。经过不断优化结晶条件并采用soaking硒代尿素、重金属衍生物及卤素原子等方法获得具有反常散射信号的衍射数据,再通过SAD等方法解析出F蛋白结构。为了证明F蛋白在溶液中的状态,我们进行了静态光散射和X射线小角散射(SAXS)等实验验证。我们完成了对杆状病毒F蛋白的膜外区域结构的解析,在该领域取得了较大的进步。