目的:高血压是导致心血管疾病死亡的主要原因之一。儿童和青少年高血压是成年期高血压的危险因素,与成年期心血管疾病的发病率和死亡率密切相关。近年来,儿童和青少年的高血压发病率不断上升,其预防和治疗越来越受到重视。压力感受性反射在维持动脉血压相对稳定中起重要作用,延髓孤束核(nucleus tractus solitaries,NTS)是压力感受性反射传入神经中枢的第一级中继站,是控制心血管反射功能的中枢关键部位。外周和中枢中的ACE2—Ang1-7—Mas轴可通过对抗ACE—Ang II—AT1轴发挥心血管保护和降低血压作用。慢性间歇性低压低氧(Chronic intermittent hypobaric hypoxia,CIHH)可通过易化压力感受性反射对肾血管性高血压具有明显的降血压作用。本实验旨在应用功能学、电生理学、免疫荧光技术、分子生物学等方法研究CIHH对幼年自发性高血压大鼠压力感受性反射的调节作用,以及NTS中Ang1-7在其中的作用机制。方法:三周龄自发性高血压大鼠((spontaneously hypertensive rats,SHR)和同龄正常血压对照(Wistar Kyoto rats,WKY)大鼠随机分为4组:WKY组、WKY+CIHH组、SHR组和SHR+CIHH组。WKY+CIHH组和SHR+CIHH组接受35天模拟海拔4000米的低压低氧处理(每天5小时)。WKY组和SHR组除不进行低压低氧处理,其余饲养环境和条件均与前两组一致。每周定时测量大鼠的动脉血压和体重。记录麻醉大鼠血压(blood pressure,BP)、心率(heart rate,HR)和肾交感神经放电活动(renal symathetic nerve activity,RSNA)。静脉注射苯肾上腺素与硝普钠观察血压变化时对应的肾神经放电及心率的变化,得出压力感受性反射的功能曲线,并比较各组间的差异。NTS内微量注射Ang1-7和Mas受体阻断剂A779,观察各组大鼠压力感受性反射的变化。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中Ang1-7的浓度。应用免疫荧光技术观察各组大鼠NTS中Ang1-7和Mas受体水平。应用Western blot方法测定各组大鼠NTS中ACE2和Mas受体的蛋白表达。结果:1.CIHH处理前,各组之间基础血压无显著性差异。随着大鼠的发育,SHR动脉血压逐渐增高,在6周龄时SHR组收缩压已显著高于同龄WKY组(P<0.05),7-8周龄时,SHR收缩压、舒张压、平均动脉压均显著高于同龄对照WKY组(P<0.05,P<0.01);而WKY组大鼠血压并未随着大鼠发育发生显著变化(P>0.05)。CIHH处理5周可显著降低SHR大鼠动脉收缩压、舒张压、平均动脉压(P<0.01),但仍高于同龄WKY组。CIHH处理对WKY大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压无影响(P>0.05)。随着周龄增长,各组大鼠体重稳步增高,心率稳定下降,CIHH对体重和心率无显著性影响(P>0.05)。2.ELISA结果显示,SHR组大鼠血清中Ang1-7水平低于WKY组(P<0.01),CIHH可提高SHR血清中Ang1-7水平。免疫荧光结果显示,与WKY组相比,SHR组大鼠NTS中Ang1-7(P<0.05)和Mas受体的数量(P<0.01)显著减少。但是,与SHR组相比,SHR+CIHH组Ang1-7和Mas受体数量增加(P<0.05)。CIHH对WKY大鼠血清和NTS中Ang1-7以及NTS中的Mas受体数量无影响(P>0.05)。3.用原始肾交感神经放电计算出大鼠RSNA积分变化的相对值反映其放电活动。与WKY组相比,SHR大鼠压力反射性交感抑制和压力反射性心率抑制减弱,曲线斜率减小并向右上方移动。CIHH处理可使SHR的RSNA和心率的压力反射性功能曲线斜率增大,且向左下方移位。CIHH对WKY大鼠压力反射性功能曲线无影响。结果表明,幼年SHR大鼠压力感受性反射功能受损,CIHH处理能改善幼年SHR大鼠压力感受性反射功能。4.NTS微量注射Ang1-7可改善幼年SHR大鼠压力感受性反射功能,增强其压力反射性交感抑制和心率抑制反应。而NTS微量注射Mas受体阻断剂A779可弱化CIHH对受损压力感受性反射功能及其压力反射性交感抑制和心率抑制反应的易化作用。5.Western blot结果显示,与WKY组相比,SHR组NTS中ACE2和Mas受体表达显著减少(P<0.05,P<0.01)。与SHR组相比,SHR+CIHH组NTS中ACE2和Mas受体表达显著增加(P<0.05)。WKY组与WKY+CIHH组NTS中ACE2和Mas受体表达无显著性差异(P>0.05)。结论:CIHH可通过增强NTS中ACE2-Ang1-7-Mas轴的功能,改善受损的幼年SHR大鼠压力感受性反射功能,降低幼年SHR大鼠的动脉血压。