义齿树脂基托表面粗糙度与细菌黏附和色素沉着关系的研究

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目的:义齿基托材料表面粗糙度与细菌黏附及色素沉着密切相关。光滑的修复体表面能减少口腔细菌黏附及色素沉着,提高美观效果,使患者感觉舒适。以往对表面粗糙度的研究多集中于细菌黏附,且菌种单一,对色素沉着的研究较少。临床上对义齿打磨抛光的标准多以基托出现光泽即可,缺乏相应的标准。本文通过体外实验用白色假丝酵母菌、变形链球菌、粘性放线菌对义齿基托材料进行细菌粘附,并用可口可乐对义齿基托材料进行色素沉着实验,来探讨义齿基托表面粗糙度与细菌黏附和色素沉着的关系,为活动义齿打磨抛光提供依据。方法:(1)义齿基托试样制备制作20×10×2mm的长方体试样(精度为0.1mm),随机分为ABCDEFG7组,每组30个,各组再随机分为5小组,每组6个。ABCDE组分别用280#,600#,1000#,1500#,2000#耐水砂纸由同一操作者手工打磨,以10cm的直径顺时针方向打磨5秒/次共40次。F组用2000#砂纸打磨后即在E组的基础上用浮石粉抛光(3000r/min)横向竖向各1分钟,G组用2000#砂纸打磨后即在E组的基础上用抛光膏抛光。各组试样制备后置冷水中备用。(2)测试试样的表面粗糙度按照国家标准(GB3502-83)用电动触针式轮廓仪测定各试样的表面粗糙度Ra值。取试样长度为4mm,前进速度0.5mm/s,每个试样取8个点(横向纵向及任意方向)测试值,取其平均值即为该试样的Ra值。(3)细菌黏附实验取白色假丝酵母菌、变形链球菌、粘性放线菌接种于牛心脑浸液培养基中,用分光光度计调整细菌浓度至A540nm=0.6待用。各测试试样超声清洗,高压蒸汽消毒后放入已配好的人工唾液,于37℃恒温箱中放置24小时。无菌工作台中将各试样从人工唾液中取出后立即分别浸入细菌悬浮液中培养24小时。取出试样在无菌蒸馏水下冲洗10秒,以洗掉未黏附的细菌。用lmol/L PBS进行离心振荡洗涤(2250rpm)2min,收集各洗涤原液并进行10倍系列稀释至10-3,用微量取样枪取10μl能准确计数的最佳稀释度样液滴注于琼脂平板培养基上充分推匀,厌氧培养24h后进行菌落形成单位计数,每个试样涂布三个平板,取其平均值为菌落形成单位计数量,并根据稀释倍数换算成试样单位面积的菌落形成数。(4)色素沉着实验试样的浸泡与测色将实验组试样浸泡于可口可乐中,对照组置于人工唾液,避光置放于恒温箱中,浸泡时间4周。在试样浸泡前测量其表面色度值。4周后将待测试样取出,自来水下冲洗30s,自然干燥。使用电子比色仪,采用CIE-1976-L*a*b*标准色度系统,记录L*、a*、b*值,每试样测定3次,取均值,以浸泡前为基准,计算AE值。结果:(1)7组试样表面粗糙度Ra值分别为1.0200±0.05、0.7100±0.08、0.4046±0.10、0.2000±0.05、0.0950±0.06、0.1020±0.05、0.0248±0.01;随着试样表面粗糙度降低,变形链球菌、白色假丝酵母菌、粘性放线菌粘附量(CFU/mm2)分别从1.90×104降低到0.22×104(P<0.05)、1.20×104降低到0.09×104(P<0.05)、1.25×104降低到0.70×104(P<0.05),(2)随着Ra值的降低7组试样的色差值△E由10.60降低到0.89(P<0.05)。结论:1、随着表面粗糙度的降低,细菌黏附量下降,三种细菌的粘附量与表面粗糙度基本成正相关变化。Ra值0.2μm时细菌粘附量仍处于相对较高水平,且仍随着Ra值的降低而降低。2、同一粗糙度值的试件细菌粘附量的多少与细菌种类有关。变形链球菌粘附较多,白色假丝酵母菌粘附量较少。抛光膏抛光组Ra比浮石粉组小,细菌黏附量比浮石粉抛光组少(P<0.05)。3、表面粗糙度与色素沉着成正相关变化(P<0.05)。当Ra值为0.1μm时,色差为具有临床意义的可接受的变色,色素沉着处于较低水平且不再有明显变化。4、因此,综合细菌粘附和色素沉着两方面的研究,建议聚甲基丙烯酸义齿基托表面粗糙度应至少达到0.1μm。
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