【摘 要】
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目的 了解不同保存方法对生物衍生骨支架材料理化性能、细胞相容性、异位成骨作用和修复骨缺损效果的影响。方法 冻干生物衍生骨用两种不同保存液同等条件下4℃冰箱冷藏保存3
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目的 了解不同保存方法对生物衍生骨支架材料理化性能、细胞相容性、异位成骨作用和修复骨缺损效果的影响。方法 冻干生物衍生骨用两种不同保存液同等条件下4℃冰箱冷藏保存3和6个月,以保存相同时间冻干生物衍生骨为对照。①不同保存方法对材料理化性能的影响:监测保存液的颜色、透明度和沉淀物,以及材料大小和体积等变化,初步了解保存液和材料是否变性、是否有细菌生长。扫描电镜观察并测定材料的孔径和孔隙率,材料定期随机抽检行细菌培养,检测保存3和6个月材料的力学强度。②不同保存方法对材料细胞相容性的影响:实验根据不同方法保存的生物衍生骨材料分为A、B、C组,A组:成骨细胞复合1号保存液处理材料培养;B组:成骨细胞复合2号保存液处理材料培养;C组:成骨细胞复合冻干骨培养,以2×106个/ml密度的成骨细胞悬液复合材料培养1、3、5和7天。用倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞的黏附和生长,检测细胞活力、ALP活性和BGP含量,流式细胞仪分析细胞周期。③不同保存方法对材料异位成骨的影响:选择60只新西兰白兔,将材料植入动物脊柱两侧的肌肉内。实验根据植入不同方法保存的生物衍生骨材料分为A、B、C组,A组:植入1号保存液处理材料;B组:植入2号保存液处理材料;C组:植入冻干材料。A、B、C组根据材料是否复合成骨细胞培养进一步分为A1和A2、B1和B2组、C1和C2组,A1、B1、C1组于动物脊柱左侧植入组织工程骨,A2、B2、C2组于右侧植入单纯生物衍生骨材料。术后4、8周取材,行Brdu标记细胞检测、组织学观察和计算机图像分析。④不同保存方法对材料修复骨缺损的影响:选择120只新西兰白兔,制作15mm长的双侧桡骨节段性骨缺损模型。实验根据植入不同方法保存的生物衍生骨材料分为A、B、C组,A组:植入1号保存液处理材料;B组:
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