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目的：1、制备负载光敏剂Photosan的空心氧化硅纳米粒子(以下简称纳米化Photosan),并初步探讨纳米化Photosan的药物安全性。2、探索并比较Photosan及纳米化Photosan介导的光动力疗法(Photodynamic Therapy, PDT)在体外试验中对胆管癌的疗效。3、探索并比较Photosan及纳米化Photosan介导的PDT在体内试验中对胆管癌的疗效。4、探索并比较Photosan及纳米化Photosan介导的PDT抑制胆管癌生长的可能途径。方法：1、采用一步湿化学方法制备负载Photosan的空心氧化硅纳米粒子。2、体外实验中,用MTT法检测Photosan及纳米化Photosan介导的PDT对人胆管癌QBC939细胞的杀伤作用。观察不同的光敏剂孵育时间、光敏剂浓度,及光照剂量对PDT效果的影响,并了解这两种光敏剂的暗毒性,比较其药效差异。用流式细胞计数实验进一步观察两种光敏剂应用于PDT的效果,并比较它们之间的差异。光学显微镜下观察PDT前后细胞的形态学改变。3、建立裸鼠人胆管癌移植瘤模型,观察Photosan及纳米化Photosan介导的PDT对肿瘤的抑制作用及它们之间的差异。观察光敏剂对动物有无毒副作用。病理切片下观察PDT后肿瘤组织细胞的形态学改变。4、检测裸鼠肿瘤PDT治疗后对其血管生成、侵袭能力及细胞凋亡的影响,并对比两种光敏剂间的区别。所用方法为用PCR、 western-blot、免疫组化等检测相关基因在mRNA和蛋白表达的水平的区别。结果：1、成功制备了负载Photosan的空心氧化硅纳米粒子,实现了光敏剂Photosan的纳米化。2、MTT法结果显示Photosan及纳米化Photosan介导的PDT均对胆管癌细胞有明显的杀伤作用(P<0.05),而后者的杀伤作用更强(P<0.05)。光动力作用在一定范围内与光敏剂的孵育时间、光敏剂的浓度及光照剂量均呈正相关的关系。两种光敏剂均无明显的暗毒性,但两者具有不同的最佳作用参数。纳米化Photosan的最佳作用参数中,其所需的光敏剂浓度更低,孵育时间更短。Photosan及纳米化Photosan的流式细胞计数实验显示,使用各自的最佳作用参数时,后者的细胞杀伤效果明显强于前者(P<0.05)。两者对细胞杀伤的途径均以诱导凋亡为主,而后者中细胞坏死的比例高于前者。光学显微镜下亦可观察到纳米化Photosan对肿瘤细胞的杀伤作用更强,且坏死细胞的比例更高。3、动物实验结果显示,在使用各自的最佳作用参数时,Photosan与纳米化Photosan介导的PDT均对胆管癌有明显的抑制作用(P<0.05),而后者作用更强(P<0.05)。病理切片结果亦显示,后者对肿瘤的杀伤效果更为明显。4、Photosan及纳米化Photosan介导的PDT作用于胆管癌后,与肿瘤血管生成、侵袭能力相关的基因在mRNA及蛋白水平的表达均下调(P<0.05),与细胞凋亡相关的基因表达上调(P<0.05)。且后者相较于前者,对肿瘤侵袭能力及细胞凋亡的影响更为强烈(P<0.05)。结论：1、采用一步湿化学方法可制备出负载Photosan的空心氧化硅纳米粒子,实现光敏剂Photosan的纳米化,且纳米化Photosan无明显毒性。2、Photosan及纳米化Photosan介导的PDT均对胆管癌细胞具有明显的杀伤作用,而后者的杀伤作用更强。光动力作用在一定范围内与光敏剂的孵育时间、光敏剂的浓度及光照剂量均呈正相关的关系。纳米化Photosan较之于普通Photosan,带来的光动力效应更强,达到有效治疗浓度的速率更快。3、Photosan及纳米化photosan介导的PDT均在裸鼠人胆管癌移植瘤模型上证实具有明显的治疗作用,且Photosan纳米化后可缩短给药——光照时间间隔,增强光动力效应。4、Photosan及纳米化Photosan介导的PDT治疗肿瘤的机制至少包括了三个方面,即抑制肿瘤的血管生成、降低肿瘤的侵袭能力以及诱发肿瘤细胞的凋亡。且纳米化Photosan减轻肿瘤的侵袭性以及诱发肿瘤细胞凋亡的能力均明显强于Photosan。