小麦Mlo基因cDNA片段的克隆与小麦幼叶cDNA文库的建立

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从小麦中分离Mlo基因cDNA,利用反义技术或基因打靶技术来抑制或关闭Mlo基因的表达,有望选育出具有广谱白粉病抗性的小麦品种.为了研究小麦Mlo基因的结构、功能及其调控,进一步培育小麦及其它作物的抗病转基因品种,我们开展了本项研究.该工作以小麦品种辉县红的三叶期幼叶为材料,提取其总RNA,根据已发表的序列设计引物,经RT-PCR反应获得约1.4kb的特异性产物,与预期扩增产物的分子量相符.利用T-载体克隆了该产物,插入片段经测序分析、比较,发现与已发表的小麦Mlo基因cDNA序列(其在GenBank中的序列号为AF384144.1)仅存在3个碱基的差异,相同性达99﹪,结果表明我们已成功克隆到小麦Mlo基因cDNA的片段,为今后反义载体和双链RNA抑制载体的构建奠定了基础.
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