建立了一种基于一维固相pH梯度等电聚焦电泳(1DIPG-IEF)结合MALDI-TOF-MS，CapLC-Nanoflow-MS/MS和MALDI-TOF-TOF-MS鉴定混合蛋白质的方法。本研究考察了1DIPG-IEF的上样量、染色方法、重复性和胶内酶切技术。详细比较了5种染色方法的效果，B2法无“酸性端歧视效应”，脱色速度快，与质谱兼容，在功能蛋白质组学研究中有应用前景。优化了IPG胶条的胶内酶切实验技术。1DIPG-IEF比1DSDSPAGE分离能力高，更适合鉴定蛋白质异构体。1DIPG-IEF也可无需酶切直接分析胶内蛋白质。 将上述方法用于人白血病细胞K562提取物的蛋白质鉴定，共鉴定出33个蛋白质。12个蛋白质与文献报道相同。其中用MALDI-TOF-TOF-MS鉴定出18个蛋白质；用LC-MS/MS鉴定出16个蛋白质，平均由3～5个肽段(最多7个)鉴定一个蛋白质，具有较高可信度，适合分析较复杂蛋白质混合物。 用阿糖胞苷(Ara-c)诱导HL-60细胞凋亡，用透射电镜进行细胞形态学观察。给药6h后，HL-60细胞出现早期凋亡特征，24h后HL-60细胞进入凋亡中晚期。构建了HL-60细胞凋亡全过程的1DIPG-IEF差异表达图谱。未经Ara-c处理的HL-60细胞的IPG-IEF有49个条带，经Ara-c作用6、12、24、36h后条带分别减少到30、29、29和28条，约减少40％，碱性蛋白条带减少幅度大。差异蛋白条带经Denovo测序，鉴定了6个较重要蛋白质。其中组蛋白H2B只在给药6h时出现且相对量很高，可能是HL-60细胞早期凋亡的特征之一。核内不均一核糖核蛋白异构体A1在两种白血病细胞中均出现，有可能作为潜在的诊断标志物之一。延长因子1a样蛋白与蛋白质生物合成、蛋白降解、信号转导通路有关。蛋白量随给药时间的变化主要呈现4种类型：山峰型的峰顶在给药6h，可能与凋亡启动相关；峭壁型的转折点在给药24h，这些蛋白可能有抗凋亡作用。