几种产油微藻的筛选与调控培养

来源 :哈尔滨师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yideng
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随着全球经济的快速发展,世界范围内的环境污染日益严重,不可再生资源正在迅速枯竭,亟需寻找一种可替代的清洁能源,生物质能因其环保和可再生等特点被认为是未来社会可持续发展的重要组成部分。微藻生产的生物能源类型是生物燃料,如生物乙醇、沼气、生物柴油、固体燃料和生物电力。为探究不同环境因子对微藻生长及产油的影响和氮源对黄丝藻油脂代谢中关键酶的影响。本研究选取62株产油藻株进行筛选,筛选出5种油脂含量较高的藻株为研究对象,进行在不同环境因子下生长、油脂测定和油脂代谢相关酶测定实验,探究5种产油微藻最适生长及产油的培养条件,比较舟形藻(Navicula amphiceropswas)、两栖菱形藻(Nitzschia amphibia)、变异直链藻(Melosira varians)、双对栅藻(Scenedesmus bijuga)和黄丝藻(Tribonema sp.)的生物量和油脂含量,并对黄丝藻在不同氮浓度油脂代谢过程中关键酶进行测定。主要结果如下:(1)对62株微藻油脂含量进行了测定并评价(硅藻门44株,绿藻门17株,黄藻门1株),采用甲醇—氯仿法测定,根据油脂含量的高低,筛选出5株油脂含量超过27.5%的微藻,它们是黄丝藻、舟形藻、两栖菱形藻、变异直链藻和双对栅藻。(2)在三种硅藻最适生长条件下比较生物量,发现在光照强度为4000 Lx、20 mg·L-1K2HPO4、6 g·L-1Na Cl时,两栖菱形藻的生物量高于舟形藻,有显著性差异。通气量为1 V·V-1·min-1时,两栖菱形藻的生物量显著高于变异直链藻(P<0.05)。这三种硅藻中,两栖菱形藻生物量最大,生长速度最快。在三种硅藻最适油脂积累条件下进行比较,发现在初始密度为40 ml·L-1培养时,两栖菱形藻的油脂含量和油脂产率均达到最大值33.89%和2.82 mg·L-1·d-1,显著高于舟形藻和变异直链藻(P<0.05)。(3)不同环境因子对双对栅藻生长及产油影响:温度为20℃,p H=7.0,通气量为1 V·V-1·min-1,光照强度4000 Lx,光暗周期为12 h:12 h时最适合双对栅藻生长。0.1 g·L-1KNO3时双对栅藻生物量达到最大值为0.779 g·L-1,20 mg·L-1K2HPO4时其油脂含量和油脂产率达到最大值为38.07%和3.17 mg·L-1·d-1。双对栅藻的生物量介于三种硅藻和黄丝藻之间,但油脂含量低于黄丝藻和三种硅藻。(4)不同环境因子对黄丝藻生长及产油影响:在通气培养下,温度至20℃,光照强度4000 Lx,p H=7.0,培养基中加入N、P的培养条件下黄丝藻的生长显著增加,20 mg·L-1K2HPO4时黄丝藻生物量达到最大值为7.37 g·L-1,油脂含量和油脂产率达到最大值为51.93%和14.83 mg·L-1·d-1。黄丝藻的生物量及油脂含量均高于三种硅藻和双对栅藻。(5)黄丝藻在不同氮浓度下油脂代谢过程中关键酶影响:尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)的活性与与初始氮浓度呈正相关,且随着培养时间的增长其酶活性逐渐下降,而二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)与之相反,β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-Glu)和乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的活性均随着培养时间的增长先升高后降低。本研究通过对舟形藻、两栖菱形藻、变异直链藻、黄丝藻和双对栅藻这5株产油藻株进行环境调控,发现它们最适的培养环境几乎是相同的。不同环境因子下5株微藻的生物量、油脂含量、油脂产率和油脂分布都会发生特异性变化,本研究结果增加了目前已知产油微藻的数目,且为规模化培养微藻提供可供参考的基础数据。研究不同氮浓度对黄丝藻油脂代谢中关键酶的影响,为生产微藻油脂过程中合理控制氮源浓度提供了依据。
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