(-)γ-内酰胺是合成阿巴卡韦((-)abacavir)的中间原料,具有巨大经济价值。与化学法相比,微生物酶法拆分(±)γ-内酰胺具有较好的应用前景。从腾冲嗜热杆菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)克隆出内酰胺酶表达在Escherichia coli (E. coli)中,并且在N端和C端都具有多聚组氨酸标签,该蛋白可用亲和层析柱一步存化。利用同样的载体,可将该酶蛋白固定化。游离酶的最佳pH及最佳温度分别是7.0和80℃,而游离酶为9.5和90℃。而且固定化酶显出了比游离酶更高的温度和pH耐受性。将固定化载体装柱,并可将该酶一步存化固定化于该柱上,其中1m1载体吸附酶量为4.332mg,使用该固定化酶柱,让底物以一定流速过柱转化,在固定化酶稳定性方面,每天转化5小时,连续使用27天,基本能保持与第一天相同的酶活,显示出了非常好的稳定性。在酶活降低后,可以将酶进行洗脱,并将柱子再生,可重复使用。此方法与传统酶固定化酶方法相比,有操作简单,酶活回收率高,费用低等优点。乳糖因其价格低廉,能大大降低诱导成本,使在重组E. coli表达外源蛋白质的发酵中代替IPTG作为诱导剂的研究有着十分重要的现实意义,本实验采用大肠杆菌BL21(ED3)菌株为宿主菌,研究了乳糖诱导表达克隆在PET—30载体中的γ-内酰胺水解酶基因,乳糖诱导目的蛋白最大表达量能达到总蛋白量62%。通过中试放大,1m3发酵液能得到6.5Kg湿菌体,而且测活显示出了良好的催化活性。