武汉市猫传染性腹膜炎病例分析及病毒的分离与鉴定

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猫传染性腹膜炎(Feline infectious peritonitis,FIP)是由猫传染性腹膜炎病毒(Feline infectious peritonitis virus,FIPV)引起的猫科动物的一种慢性、渐进性、致死性传染病,以腹膜炎、大量腹水积聚或各脏器出现肉芽肿病变以及致死率较高为主要临床特征。该病在世界各地呈地方性流行,其高致死率对伴侣动物行业造成了较大的经济损失。因此,开展对FIP病原学、流行病学、致病机制及预防治疗措施等的研究具有重要意义。本研究旨在调查湖北省武汉市FIP的流行情况,基于华中农业大学动物医院的门诊临床病例,运用猫冠状病毒抗原快速诊断试纸条和RT-PCR检测技术,对2017年11月至2018年9月的1036例临床病例进行FIP检测,并对病例的发病情况和特点进行统计分析。共检出FIP阳性病例61例,检出率为5.9%。从时间分布看,2018年1月的检出率最高,占13.4%,其余月份的检出率为6.0%~8.0%。从群间分布看,英国短毛猫和田园猫的患病比例较高,占总阳性病例的63.9%,其中英国短毛猫占到了41.0%,而田园猫比例在10.0%以上。就诊阳性病例中,雄性猫(70.0%)的患病比例明显高于雌性猫(30.0%),且FIP阳性病例主要为12个月龄以内的幼猫(72.1%)。本研究表明湖北省武汉市猫FIP的发生率与猫的品种、年龄和性别等存在一定的关系。为了分析当前武汉地区FIP阳性猫的分子流行病学特征,本研究对临床FIP猫所感染的病毒进行了分离与鉴定。并从12份阳性病料中成功分离到12株FCoV毒株HN-1~HN-12,随机选取其中5株进行了S基因片段测定并采用MEGA6.0软件进行进化树分析,发现其中4株毒株在S基因分型上同属于FCoV I血清型,并且同属猫肠道冠状病毒(Feline enteric coronavirus,FECV)生物型,其中HN-6毒株形成一个单独的亚群。为了更进一步探究其分离毒株毒力相关基因3c和7ab的分子生物学特征,本研究对分离出的12株毒株的3c和7ab进行扩增,对阳性样品构建血清型和生物型遗传进化树。3c血清型遗传进化树分析显示,其中8株属于FCoV I,1株属于FCoV II,另外2株形成一个独立的亚群。3c生物型遗传进化树分析显示,其中8株属于FECV,1株属于FIPV,剩下2株形成一个独立的亚群。7ab基因血清型遗传进化树分析显示,其中3株属于FCoV I,2株属于FCoV II,另外4株形成一个独立的亚群。7ab基因生物型遗传进化树分析显示,其中3株属于FECV,2株属于FIPV,剩下4株形成一个独立的亚群。基于各毒株的S、3c、7ab基因的血清型和生物型遗传进化分析结果,HN-1和HN-8毒株血清型上属于FCoV I,而其它各毒株基于不同基因分型得出不一样的结果,表明进化树分析能够确定其遗传进化关系,但不能分析其血清型和生物型。本研究解析了武汉地区FIP的的分子流行特点,为武汉地区FIP的防控奠定理论基础,并为针对性地开发临床FIP疫苗提供帮助。综上所述:本研究基于武汉市华中农业大学动物医院2017年11月至2018年9月临床病例流行病学情况,掌握了FIP在武汉地区的流行发病特点,并分离出12株FCoV毒株,基于S、3c、7ab基因,进行血清型和生物型遗传进化分析,并探究了毒株3c、7ab的分子生物学特征,为临床该病的防治提供了理论基础。
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