瑶医水莲风亏方对大鼠盆腔炎性疾病后遗症的炎性干预机制研究

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目的:通过观察瑶医水莲风亏方对盆腔炎性疾病后遗症大鼠血清中细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、细胞因子白细胞介素-8(IL-8)及子宫组织中血管内皮生长因子VEGF、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达影响,探究其对盆腔炎性疾病后遗症(SPID)大鼠的作用及其可能机制。方法:选用60只SPF级雌性SD大鼠作为受试对象,将其适应性喂养7日后,用随机数字法将50只造模后的大鼠分为模型组、妇科千金片组和瑶医水莲风亏方高、中、低剂量组,每组各10只,剩余未予造模的10只大鼠设为空白组。除空白组外均选用“机械损伤+混合菌感染”法复制SPID模型。造模成功后模型组灌胃给予等容积的蒸馏水,空白组正常喂养,其他治疗组以相应药物治疗。灌胃21天后,取各组大鼠子宫组织进行观察;HE染色后观察子宫组织形态学改变;酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清中细胞因子IL-6、IL-8的含量;蛋白印记法(Western blot法)检测各组大鼠子宫内VEGF、MMP-2的蛋白表达水平。结果:(1)形态学观察:肉眼观察可见模型组SPID大鼠子宫及双侧输卵管组织出现明显充血、局部肿胀,宫与盆腔周围组织粘连或有盆腔积液形成;空白组子宫及输卵管组织未见充血、肿胀及盆腔组织粘连的情况;其余治疗组子宫及输卵管组织仅见少量以上病理形态。HE染色镜下观察,空白组子宫内膜腔壁结构清晰,无充血水肿与坏死脱落,未见炎性细胞浸润。模型组子宫内膜腔壁结构改变,内膜充血水肿,且有大量上皮细胞增生、变性、坏死,有大量或层状性炎性细胞浸润,腺体细胞萎缩变形。水莲风亏方高剂量组,子宫内壁结构层次基本清晰,上皮细胞排列较整齐,少量上皮细胞变性、坏死,腺体基本完整,少量炎性细胞浸润,未见明显粘连,浆膜层结构基本完整;其余治疗组子宫内膜炎症表现均轻于模型组,重于水莲风亏方高剂量组。(2)对血清IL-6、IL-8含量的影响:与空白组比较,模型组IL-6、IL-8的含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,妇科千金片组,瑶医水莲风亏方高、中、低剂量组IL-6、IL-8的含量均明显降低(P<0.05),与妇科千金片组比较,瑶医水莲风亏方高、中剂量组IL-6、IL-8的含量下降水平无明显差异(P>0.05),但瑶医水莲风亏方高剂量组IL-6、IL-8的含量较瑶医水莲风亏方中剂量组明显降低(P<0.05);瑶医水莲风亏方低剂量组IL-6、IL-8的含量较妇科千金片组明显升高(P<0.05)。(3)对子宫组织中VEFG、MMP-2蛋白表达的影响:与空白组比较,模型组大鼠子宫组织中VEGF和MMP-2蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,妇科千金片组,瑶医水莲风亏方高、中、低剂量组大鼠子宫组织中VEGF和MMP-2蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:1.肉眼观察和病理学观察均显示,瑶医水莲风亏方对SPID大鼠有明显的治疗作用,可明显改善子宫内膜组织充血、水肿及盆腔组织粘连等炎症状态,减少上皮细胞的坏死、脱落和炎性细胞浸润。2.瑶医水莲风亏方治疗SPID的作用机制可能与下调各组大鼠血清中促炎症因子IL-6、IL-8的水平和降低子宫组织蛋白中VEGF、MMP-2的表达有关。瑶医水莲风亏方可抑制机体促炎症因子的释放,降低体内的炎症反应、血管通透性,抑制粘连及瘢痕组织的形成,具有缓解盆腔内的充血、水肿,促进组织修复的作用。
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