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猪断奶后多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS)是由猪2型圆环病毒(Porcine circovirus type2, PCV2)引起的一种猪的重要传染性疾病。PMWS最早于1991年在加拿大西部被发现,之后便在全世界范围内流行。该病主要侵害断奶仔猪,临床表现为仔猪发热、进行性消瘦、苍白、黄疸、呼吸衰竭及消化系统功能紊乱等症状。猪圆环病毒(Porcine circovirus, PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属,属DNA病毒。分为1型(PCV1)和2型(PCV2)。PCV1是细胞污染物,无致病性；PCV2有致病性,PCV2的感染可以造成免疫抑制,引起猪相关疾病的继发和并发感染,如增生性坏死性肺炎(PNP)、猪皮炎与肾炎综合征(PDNS)、以及猪呼吸道综合征(PRDC)、先天性震颤、肠炎、繁殖障碍等。目前,PCV2成为世界范围内对养猪业危害最严重的病原之一。PCV2基因组包含11个开放阅读框,其中ORF1和ORF2是主要的阅读框。ORF1编码Rep蛋白,与病毒复制相关,此蛋白在这两型病毒之间有85%同源性,是引起PCV1和PCV2抗原交叉反应的主要原因。ORF2编码的Cap蛋白是病毒的主要结构蛋白,是型特异性抗原,具有良好的免疫原性,在两型PCV之间不发生抗原交叉反应。本研究建立了PCV2抗体间接ELISA检测方法。这种方法的特点是敏感、快速、特异,并能够有效鉴别2型PCV的感染,对PCV2快速诊断、流行监测和防控具有重大的意义。1.克隆了PCV2 ORF2基因片段,在大肠杆菌原核表达系统中表达ORF2基因片段。结果表明,该基因片段在BL21中成功表达,融合蛋白的相对分子质量约为26kDa,并能为PCV2阳性血清所识别。2.以表达的Cap蛋白作为包被抗原,建立PCV2 Cap蛋白间接ELISA检测方法；利用建立的间接ELISA方法对猪场的80份血清进行检测,并与商品化的试剂盒进行了对照,检出阳性率为60%,两种方法符合率为93%。3.利用PCV2河南株病毒抗原免疫Balb/c小鼠,通过建立的间接ELISA方法检测筛选,最终获得2株稳定分泌抗PCV2单克隆抗体的细胞株：2B11-C1、3F2-A10。特异性实验表明：2B11-C1、3F2-A10不与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪乙脑病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及正常PK-15细胞反应,特异性良好。两株PCV2单抗的获得,为进一步建立特异、敏感、准确快速的PCV2检测方法打下了基础。