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目的:探讨高糖、胰岛素对肾小球系膜细胞GLUT4和CAP的mRNA表达及细胞骨架蛋白F-actin的影响,进一步研究糖尿病肾病发生发展中GLUT4及其下游分子F-actin和CAP的重要作用。 方法:将培养的大鼠1097系膜细胞株分为8组,正常对照组,生理浓度胰岛素组(10-9M),低浓度胰岛素组(10-8M),高浓度胰岛素组(10-6M),高糖组(30mM),甘露醇组,高糖加高浓度胰岛素组,高糖加生理浓度胰岛素组。本研究采用半定量RT-PCR法和免疫组化法,观察高糖刺激,不同浓度胰岛素作用下,鼠1097系膜细胞中GLUT4和CAP mRNA的表达及其变化。Rhodamine-phalloidin染色,激光共聚焦显微镜观察F-actin形态并测定荧光强度。同时采用免疫组化法测定系膜细胞GLUT4的表达,从细胞分子水平探讨高糖、胰岛素干预下,GLUT4与Cbl/CAP信号通路及相关信号分子对GLUT4易位及葡萄糖转运的影响。 结果:正常对照组系膜细胞中GLUT4和CAP mRNA有一定表达。高糖组GLUT4 mRNA和CAP mRNA表达明显下降;F-actin解聚增加。甘露醇组中二者无明显变化。不同浓度胰岛素组系膜细胞GLUT4mRNA和CAP mRNA表达随胰岛素浓度增加而增加。GLUT4表达与F-actin荧光强度相关系数为0.929(P<0.01)。GLUT4 mRNA表达与CAP mRNA相关系数为0.905(P<0.01)。