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研究目的:
类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是一种以关节慢性炎症为主的自身免疫性疾病,T辅助细胞17(Thelpercells,Th17)在其病理进程中起着重要作用。近来,髓样抑制细胞(myeloid-derivedsuppressorcells,MDSCs)因其具有重要的免疫抑制作用,成为自身免疫性疾病发病机制研究的热点。本研究的主要目的是分析RA患者外周血中MDSCs的变化及其与Th17细胞的关系,初步明确MDSCs在RA细胞免疫调节功能中的作用。
研究方法:
(1)采用流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测健康对照组(healthycontrol,HC)及RA患者外周血中MDSCs和Th17细胞的比例。
(2)利用实时定量PCR(real-timePCR,RT-qPCR)检测健康对照组及RA患者外周血中MDSCs产物精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)及Th17细胞相关因子白介素6(interleukin-6,IL-6)、白介素17A(interleukin-17A,IL-17A)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)和其特异性转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(retinoidrelatedorphanreceptorgammat,RORγt)的mRNA表达。
(3)采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbentassays,ELISA)检测健康对照组及RA患者血浆中IL-17A、IL-6、ZNF-α及Arg-1浓度。
研究结果:
(1)与健康对照组相比,RA患者外周血中的MDSCs和Th17细胞比例均显著升高(P<0.05)。
(2)RA患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-17A、IL-6、TNF-α及RORγt的mRNA表达明显高于健康对照组(P<0.05),RA患者外周血白细胞中Arg-1的mRNA表达量明显高于健康对照组(P>0.05)。而iNOS的mRNA表达量与健康对照组无显著差别(P>0.05)。
(3)与健康对照组相比,RA患者血浆中IL-17A、IL-6、TNF-α及Arg-1的浓度均显著升高(P<0.05)。
(4)经相关性分析,发现RA患者外周血中MDSCs比例与Th17细胞比例、血浆中Arg-1浓度以及白细胞中Arg-1mRNA相对表达量呈负相关(r=-0.48,P=0.01;r=-0.5,P=0.008;r=-0.55,P=-0.003)。另外,RA患者外周血中MDSCs比例也与血浆TNF-α浓度呈负相关(r=-0.55,P=0.003)。而在正常人中未发现以上相关性。
结论:
RA患者外周血中MDSCs和Th17细胞之间可能存在动态的相互作用,这种动态的相互作用可能在RA的病程进展中发挥重要作用。进一步明确局部关节组织中这群细胞的分布及功能特征,能够为RA病理机制的进一步研究提供新思路,同时也可为发展相关细胞免疫治疗提供理论依据。